[发明专利]茜草炭及其制剂的特征图谱及其构建方法和含量测定方法

说明书

本发明属于中药检测技术领域，具体提供了茜草炭及其制剂的特征图谱及其构建方法和含量测定方法，所述茜草炭及其制剂特征图谱的构建方法中包括(1)茜草炭供试品溶液的制备；(2)取茜草炭供试品溶液采用高效液相色谱法检测，填充剂采用十八烷基硅烷键合硅胶，流动相包括乙腈和水，梯度洗脱，梯度洗脱程序包括：0→1分钟→3分钟→9分钟→12分钟→20分钟，流动相中乙腈的体积百分比为10％→20％→20％→30％→30％→35％，经大量实验筛选得到特定的洗脱程序，得到5个共有特征峰，并实现了包含异茜草素的特征峰的有效分离，峰形好，基线平稳，检测时间短。

技术领域

本发明属于中药检测技术领域，具体涉及一种茜草炭及其制剂的特征图谱及其构建方法和含量测定方法。

背景技术

茜草是茜草科植物茜草Rabia cardifolia L.的干燥根和根茎，性味苦、寒，归肝经，具有凉血通经，化瘀止血的功效，临床主要用于吐血、衄血、崩漏、外伤出血、瘀阻经闭、关节痹痛、跌扑肿痛。茜草炭是由中药茜草经炒炭炮制而成的饮片，临床主要用于治疗由瘀血阻滞而引起的吐血、崩漏、外伤出血等出血症。茜草炭饮片化学成分研究主要集中在醌类、鞣质、微量元素等。其中醌类成分中异茜草素是茜草炭中主要的止血成分之一。

茜草炭配方颗粒是茜草炭饮片经现代制药技术提取、浓缩、分离、干燥、制粒包装精制而成的中药产品，具有较强的临床应用价值，市场需求广阔。现行的法定标准《中国药典》2020版只以浸出物作为定量考察项目，其量值关系不能全面反映中药成分的整体作用，其他文献研究报道《HPLC测定茜草炭饮片中1,3-二羟基蒽醌含量》，作者康辉，张振凌，周艳等。UPLC测定茜草炭中4种醌类成分的含量，作者陈星、王侃等，两篇文献主要侧重于对茜草炭饮片含测成分的研究。无法从整体上对茜草炭及其制剂进行质量检测。

目前有文献研究报道了采用高效液相色谱法建立茜草及其制剂的指纹图谱的方法。但是由于茜草炭在炮制过程中化学成分已经发生较大改变，这些针对茜草及其制剂特征图谱的构建方法并不适用于茜草炭及其制剂，当采用这些方法检测茜草炭及其制剂时，出现峰形差，峰高低，检测时间长，分离度低的问题，导致检测效果不佳。

发明内容

因此，本发明的第一个目的在于解决现有技术中的方法检测茜草炭及其制剂时得到的指纹图谱的峰形差、峰高低、检测时间长，分离度低的问题，提供了一种茜草炭及其制剂特征图谱及其构建方法和茜草炭及其制剂的含量测定方法。

具体的，本发明公开了茜草炭及其制剂特征图谱的构建方法，包括以下步骤，

(1)茜草炭供试品溶液的制备；

(2)取茜草炭供试品溶液采用高效液相色谱法检测，填充剂采用十八烷基硅烷键合硅胶，流动相包括乙腈和水，梯度洗脱，梯度洗脱程序包括：0→1分钟→3分钟→9分钟→12分钟→20分钟，流动相中乙腈的体积百分比为10％→20％→20％→30％→30％→35％。

根据本发明任一项所述的构建方法，其中，步骤(1)包括：

1)取茜草炭供试品，加溶剂提取，得到提取液；

2)将提取液固液分离，取液体，即为供试品溶液。

根据本发明任一项所述的构建方法，还满足如下A-D中的任意一项或者多项：

A、步骤1)中，溶剂选自水、甲醇、乙醇中的至少一种；

B、步骤1)中茜草炭供试品的质量与溶剂的体积之比为0.2-0.5:10-40；

C、步骤1)中，提取方式为回流提取或者超声提取，提取时间为10min-5h；

D、步骤2)中，所述固液分离为离心或者过滤。