[发明专利]一种测定联苯苄唑原料药中有关物质的高效液相色谱方法

说明书

本发明提供了一种测定联苯苄唑原料药中有关物质的高效液相色谱方法。本发明的测定联苯苄唑原料药中有关物质的高效液相色谱方法，包括如下方法：1)将联苯苄唑原料药待测样品溶于流动相中，过滤后得到待测溶液；2)采用缓冲液和溶剂的混合液为流动相，利用高效液相色谱法对标准溶液和待测溶液进行测定，获得标准曲线，并根据标准曲线分析待测溶液中联苯苄唑及有关物质的含量。本发明的高效液相色谱方法，分离选择性好，峰形对称，定量曲线呈线性，重复性好，保留时间、分离度和信号响应值稳定。

技术领域

本发明属于分析检测技术领域，涉及一种测定联苯苄唑原料药中有关物质的高效液相色谱方法。

背景技术

联苯苄唑，化学名为1-(ρ，α-二苯基苄基)咪唑，是咪唑类衍生物，一种不含卤素的咪唑类抗真菌药，无臭，在甲醇或无水乙醇中略溶，在水中几乎不溶，其药理作用为：联苯苄唑具有广谱抗皮肤癣菌、酵母菌、丝状菌和双相真菌的功效，并具有较强的抗菌活性，对糠秕马拉色菌和革兰阳性球菌亦有效，动物实验性皮肤癣菌病外用效果佳；其抗菌谱广，对90％的致病真菌有抑制作用，能抑制多种皮肤真菌(如毛癣菌属、小孢子菌属)、酵母菌(Chemicalbook，如念球菌属、瓶形酵母菌、光滑球拟酵母菌)、霉菌(如曲霉菌属)和各种真菌(如球孢子菌属、芽生菌属、组织胞浆菌属)。

联苯苄唑原料药质量标准在《中国药典》2020年版(二部)、《美国药典》36版、《欧洲药典》8.0版均有收录，其有关物质为合成过程中残留的联苯苄醇。参照《中国药典》(2020版)二部中联苯苄唑原料药有关物质测试方法：联苯苄唑的高效液相法测定是采用甲醇/水/四氢呋喃＝84/15/1(v/v/v)为流动相。

但是，当前中国药典方法存在的挑战具体为：分析方法不稳定，体现在联苯苄唑的峰形和保留时间上：1)不同种类C18反相色谱柱同样流动相配制方法，联苯苄唑的峰形均不佳；2)同样色谱方法同一瓶流动相，连续进样，联苯苄唑的重现性差；3)同一色谱柱同样流动相配制方法，但不同水来源的分离重现性不佳。溯源分析如下：1)联苯苄唑结构中的咪唑官能团在酸性条件下可被质子化，故带正电荷，可与硅胶基质的色谱填料表面硅羟基发生电荷相互作用；2)流动相使用纯水体系，因pH未受控制，导致固定相表面硅羟基和联苯苄唑电荷状态不稳定，因此影响峰形和保留时间的稳定性。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种测定联苯苄唑原料药中有关物质的高效液相色谱方法，分离选择性好，峰形对称，定量曲线呈线性，重复性好，保留时间、分离度和信号响应值稳定。

为达此目的，本发明采用以下技术方案：

一种测定联苯苄唑原料药中有关物质的高效液相色谱方法，包括如下方法：

1)将联苯苄唑原料药待测样品溶于流动相中，过滤后得到待测溶液；

2)采用缓冲液和溶剂的混合液为流动相，利用高效液相色谱法对标准溶液和待测溶液进行测定，获得标准曲线，并根据标准曲线分析待测溶液中联苯苄唑及有关物质的含量。

本发明的测定联苯苄唑原料药中有关物质的高效液相色谱方法，采用缓冲液和溶剂的混合液为流动相，流动相中采用缓冲液取代纯水，使得联苯苄唑的峰形、柱效和重现性显著改善。

步骤2)中，所述流动相中的缓冲液为醋酸盐缓冲液或磷酸盐缓冲液，优选为醋酸盐缓冲液。

优选地，所述溶剂为有机溶剂。

优选地，所述有机溶剂为甲醇。

步骤2)中，所述流动相为醋酸盐缓冲液与甲醇的混合液。

步骤2)中，所述醋酸盐缓冲液与所述甲醇的体积比为(80-90):(10-20)，优选为85:15。

步骤2)中，所述醋酸盐缓冲液中的醋酸盐包括醋酸的铵盐、醋酸的钠盐和醋酸的钾盐以及它们的水合物。