[发明专利]一种生物样本液体活检样本的处理方法（磁珠分离法）及其应用

权利要求书

1.一种样本处理方法，其特征在于，包括下述步骤：

步骤一、将磁珠混合摇匀；

步骤二、将样本进行酸化；

步骤三、将磁珠进行磁性分离；

步骤四、将磁珠润湿；

步骤五、使步骤四的润湿的磁珠吸附步骤二的酸化样本；

步骤六、使用冲洗液冲洗步骤五的磁珠；

步骤七、使用洗脱液冲洗步骤六的磁珠；

步骤八、收集洗脱液，使用仪器进行检测。

2.根据权利要求1所述的样本处理方法，其特征在于，步骤一所述磁珠选自使用疏水基团表面修饰的Fe₃O₄固相萃取磁珠，磁珠的修饰基团包括但不限于C3丙基修饰、C4丁基修饰、C8辛烷基修饰、C12十二烷基修饰、C18十八烷基修饰。

3.根据权利要求1~2所述的样本处理方法，其特征在于，步骤一所述的磁珠混合摇匀为斡旋磁珠悬浮液20~100次，移取10~50μL到离心管内备用。

4.根据权利要求3所述的样本处理方法，其特征在于，步骤一所述的磁珠混合摇匀为斡旋磁珠悬浮液20次，移取的备用体积20μL到离心管内。

5.根据根据权利要求1中所述的样本处理方法，其特征在于，所述步骤二中的样本选自血浆、血清、尿液、组织液、唾液、关节液、脑脊液中的任意一种。

6.根据权利要求1中所述的样本处理方法，其特征在于，所述步骤二中的酸化试剂选自三氟乙酸、三氟丙酸、甲酸、乙酸中的一种及以上有机酸的水溶液。

7.根据权利要求6所述的样本处理方法，其特征在于，所述步骤二中的酸化试剂为体积浓度0.1%~4%的有机酸的水溶液。

8.根据权利要求7所述的样本处理方法，其特征在于，所述步骤二中的酸化试剂为体积浓度2%的有机酸的水溶液。

9.根据权利要求1所述的磁性分离处理方法，其特征在于，所述步骤三中使用的方法为将离心管放在磁铁上10~60秒，当离心管保持在磁铁上时，用移液管抽吸出上清液。

10.根据权利要求9所述的样本处理方法，其特征在于，所述步骤三中使用的方法为将离心管放保持在磁铁上的磁性分离时间为20秒。

11.根据权利要求1磁珠润湿的方法，其中，步骤四中磁珠润湿方法包括以下2个步骤：

S1：在骤三获得的磁珠内加入润洗溶液1，混合摇匀，将磁珠进行磁性分离，吸取上清液，舍弃；

S2：在S1获得的磁珠内加入润洗溶液2，混合摇匀，将磁珠进行磁性分离，吸取上清液，舍弃。

12.根据权利要求11所述的磁珠润湿方法，其特征在于，所述步骤四中使用的润湿溶液1选自乙腈、甲醇、乙醇、丙酮中的一种及以上有机试剂的水溶液。

13.根据权利要求11中所述的磁珠润湿方法，其特征在于，所述步骤四中使用的润湿溶液1为体积浓度30%~70%的有机溶剂的水溶液。

14.根据权利要求13所述的磁珠润湿方法，其特征在于，所述步骤四中的使用的润湿溶液1为体积浓度50%的有机溶剂的水溶液。

15.根据权利要求11所述的磁珠润湿方法，其特征在于，所述步骤四中使用的润湿溶液2选自三氟乙酸、三氟丙酸、乙酸、甲酸中的一种及以上有机酸的水溶液。

16.根据权利要求11中任一项所述的磁珠润湿方法，其特征在于，所述步骤四中使用的润湿溶液2为体积浓度0.05%~0.5%的有机酸的水溶液。