[发明专利]修饰的硫代寡核苷酸及其应用

说明书

本发明提供一种修饰的硫代寡核苷酸及其应用。所述修饰的硫代寡核苷酸为硫代寡核苷酸YK102的5′末端的最后2～5个核苷酸和3′末端的最后2～5个核苷酸经过gapmer修饰而成的寡核苷酸。本发明采用gapmer策略对硫代寡核苷酸YK102的序列侧翼进行行化学修饰，从而大大提高了硫代寡核苷酸的稳定性和生物学活性，降低了细胞毒性，可用于治疗肿瘤。

技术领域

本发明涉及核酸修饰技术领域，具体地说，涉及一种修饰的硫代寡核苷酸及其应用。

背景技术

寡核苷酸，是一类30个以下碱基的短链核苷酸的总称(包括脱氧核糖核苷酸或核糖核苷酸)，反义寡核苷酸用于抑制RNA片段，防止其翻译成蛋白，在治疗癌症等疾病过程中具有积极作用。

反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotides，ASO)是靶向调节IGF1R信号通路的方法之一，其可与靶mRNA的特定序列碱基配对形成双链，从而激活RNase H降解mRNA或防止RNA翻译蛋白，从而抑制目标基因表达。迄今为止，国际上已有多个反义核酸类药物批准上市(Vitravene、Kynamro、Spinraza、Exondys 51、Defitelio、Macugen、Amondys 45、Tegsedi、Waylivra、Vyondys 53和NS-065等)。

由于反义寡核苷酸的稳定性较差，在体内容易被核酸酶降解，因此通过对合成的反义寡核苷酸进行化学修饰，以增加反义寡核苷酸的血清稳定性，从而有效地抑制目的基因的表达。

目前，人们对反义寡核苷酸在血清中的降解过程和机制缺乏足够的认识，依靠经验随机地利用修饰核苷酸取代反义寡核苷酸分子中的多个核苷酸，有时能很好地提高反义寡核苷酸分子的血清稳定性。但是，反义寡核苷酸分子的血清稳定性、生物学活性和细胞毒性之间并不存在着直接相关的关系。

在反义寡核苷酸分子中引入了过量的修饰，可能会增加修饰后的反义寡核苷酸的细胞毒性，并在很多情况下降低了反义寡核苷酸的生物学活性(CN111849988A、CN103184222B、CN113330118A)。通过修饰来提高反义寡核苷酸分子的血清稳定性和生物学活性，同时降低细胞毒性是很非常困难的，且无规律可循。

发明内容

本发明的目的是通过设计反义寡核苷酸的修饰物，来提高反义寡核苷酸分子的血清稳定性和生物学活性，同时降低细胞毒性，从而提供一种修饰的硫代寡核苷酸及其应用。

为了实现本发明目的，第一方面，本发明提供一种修饰的硫代寡核苷酸，其为硫代寡核苷酸YK102的5′末端的最后2～5个核苷酸和3′末端的最后2～5个核苷酸经过gapmer修饰而成的寡核苷酸。

所述寡核苷酸为YK102，序列如SEQ ID NO:1所示。

硫代寡核苷酸YK102是指SEQ ID NO:1所示序列中核苷酸单体之间通过3′,5′-硫代磷酸二酯键连接。

修饰的核苷酸可选自2′F-RNA、2′-O-Me、2′-O-MOE、LNA等中的任一种：

其中，Base表示碱基，选自以下碱基中的任一种：腺嘌呤，胸腺嘧啶，鸟嘌呤，胞嘧啶，尿嘧啶，5-甲基胞嘧啶；

Me为甲基。

进一步地，修饰的核苷酸单体之间通过磷酸基团、硫代磷酸酯基团或二硫代磷酸酯基团连接。

优选地，所述修饰的硫代寡核苷酸为YK102-1～YK102-9中的任一种：

YK102-1：5′-T(OMe)C(OMe)C(OMe)T(OMe)CCGGAGCCAGACT(OMe)T(OMe)C(OMe)A(OMe)-3′