[发明专利]一种MRC-5细胞复苏培养液以及复苏方法

权利要求书

1.一种MRC-5细胞复苏培养液，其特征在于，由如下体积份的组分组成：

基础培养基，7.7体积份；

质量体积比7.5%碳酸氢钠，0.2体积份；

质量体积比3%L-谷氨酰胺，0.1体积份；

胎牛血清，2体积份；

所述基础培养基为日水培养基、DMEM培养基或MEM培养基；

所述日水培养基，其成分为：氧化钠6800.0mg，氧化钾400.0mg，氧化钙200.0mg，硫酸镁93.5mg，磷酸二氢钠115.0mg，葡萄糖1000.0mg，L精氨酸盐酸盐126.0mg，一水的L-胱氨酸二盐酸盐31.4mg，L-酪氨酸36.0mg，一水的L-组氨酸盐酸盐42.0mg，L-异亮氨酸52.0mg，L-亮氨酸52.0mg，L-赖氨酸盐酸盐73.0mg，L-甲硫氨酸15.0mg，L-苯丙氨酸32.0mg，L-苏氨酸48.0mg，L-色氨酸10.0mg，L-缬氨酸46.0mg，琥珀酸75.0mg，六水的琥珀酸钠，100.0mg，酒石酸氢胆碱1.8mg，叶酸1.0mg，肌醇2.0mg，烟酰胺1.0mg，泛酸钙1.0mg，盐酸吡哆醛1.0mg，核黄素0.1mg，盐酸硫铵1.0mg，生物素0.02mg。

2.权利要求1所述的MRC-5细胞复苏培养液在细胞复苏中的用途。

3.根据权利要求2所述的用途，其特征在于，在MRC-5细胞复苏中的用途。

4.一种MRC-5细胞复苏的方法，其特征在于，包括利用权利要求1所述的MRC-5细胞复苏培养液培养融化的MRC-5细胞。

5.根据权利要求4所述的MRC-5细胞复苏的方法，其特征在于，培养条件为37±1℃培养16-18小时。

6.根据权利要求4或5所述的MRC-5细胞复苏的方法，其特征在于，包括如下步骤：

将冻存的MRC-5细胞融化，备用；

将融化的MRC-5细胞接种至MRC-5细胞复苏培养液中培养。

7.根据权利要求6所述的MRC-5细胞复苏的方法，其特征在于，所述MRC-5细胞融化步骤中，将从液氮中取出的MRC-5细胞冻存管放入经过预热的灭菌水中进行解冻。

8.根据权利要求7所述的MRC-5细胞复苏的方法，其特征在于，还包括将复苏后的细胞进行换液培养，换液培养基包括如下体积份的组分：

基础培养基，8.5-9.2体积份；

质量体积比7.5%碳酸氢钠，0.2-0.3体积份；

质量体积比3%L-谷氨酰胺，0.1-0.2体积份；

胎牛血清，0.5-1体积份；

所述基础培养基为日水培养基、DMEM培养基或MEM培养基；

所述日水培养基，其成分为：氧化钠6800.0mg，氧化钾400.0mg，氧化钙200.0mg，硫酸镁93.5mg，磷酸二氢钠115.0mg，葡萄糖1000.0mg，L精氨酸盐酸盐126.0mg，一水的L-胱氨酸二盐酸盐31.4mg，L-酪氨酸36.0mg，一水的L-组氨酸盐酸盐42.0mg，L-异亮氨酸52.0mg，L-亮氨酸52.0mg，L-赖氨酸盐酸盐73.0mg，L-甲硫氨酸15.0mg，L-苯丙氨酸32.0mg，L-苏氨酸48.0mg，L-色氨酸10.0mg，L-缬氨酸46.0mg，琥珀酸75.0mg，六水的琥珀酸钠，100.0mg，酒石酸氢胆碱1.8mg，叶酸1.0mg，肌醇2.0mg，烟酰胺1.0mg，泛酸钙1.0mg，盐酸吡哆醛1.0mg，核黄素0.1mg，盐酸硫铵1.0mg，生物素0.02mg。