[发明专利]一种生物分子或细胞富集筛网的冻干保护方法及冻干保护液在审
申请号: | 202111635968.8 | 申请日: | 2021-12-29 |
公开(公告)号: | CN114236111A | 公开(公告)日: | 2022-03-25 |
发明(设计)人: | 颜菁;周岩 | 申请(专利权)人: | 江苏汇先医药技术有限公司 |
主分类号: | G01N33/50 | 分类号: | G01N33/50;F26B5/00 |
代理公司: | 苏州创元专利商标事务所有限公司 32103 | 代理人: | 李萍 |
地址: | 215301 江苏省苏州市昆山市*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 生物 分子 细胞 富集 筛网 保护 方法 | ||
1.一种生物分子或细胞富集筛网的冻干保护方法,所述生物分子或细胞富集筛网包括筛网骨架、覆于所述筛网骨架上的高分子层及包被与所述高分子层上的能够目标生物分子活细胞特异性结合的抗体,其特征在于,包括如下步骤:
将包被有高分子层的筛网置于冻干保护液中,所述冻干保护液浸没所述筛网,其中,所述冻干保护液包括赋形剂、增稠剂及防腐剂,其中,所述赋形剂包括重量比为4~6∶1~3∶2~3的糖类、甘露醇和山梨醇;
冻干保存,使筛网被包裹在由所述冻干保护液形成的冻干粉中。
2.根据权利要求1所述的冻干保护方法,其特征在于,所述糖类、甘露醇和山梨醇的重量比为5∶2∶3。
3.根据权利要求1所述的冻干保护方法,其特征在于,所述糖类包括选自蔗糖、果糖、乳糖、半乳糖、海藻糖或葡萄糖中的一种或多种的组合。
4.根据权利要求1所述的冻干保护方法,其特征在于,所述增稠剂包括聚乙烯吡咯烷酮;和/或,所述防腐剂包括硫柳汞和/或叠氮钠;和/或,所述赋形剂、所述增稠剂及所述防腐剂在所述冻干保护液中的重量百分比分别为1%~20%、0.5%~5%及0.01%~0.1%,所述冻干保护液的其余成分包括无菌水和PBS缓冲液。
5.根据权利要求1所述的冻干保护方法,其特征在于,冻干保存具体实施如下:
-80℃±10℃预冻至少20min,或液氮速冻至少2min;
放入冻干机中-50~25℃进行冻干。
6.根据权利要求1所述的冻干保护方法,其特征在于,还包括如下步骤:
C、在使用时,用缓冲液润洗冻干粉中的筛网以去除筛网表面的冻干粉,在所述筛网的表面孵育抗体,获得能够和生物分子或细胞特异性结合的富集筛网。
7.一种生物分子或细胞富集筛网的冻干保护液,其特征在于,包括赋形剂、增稠剂及防腐剂,其中,所述赋形剂包括重量比为4~6∶1~3∶2~3的糖类、甘露醇和山梨醇。
8.根据权利要求7所述的冻干保护液,其特征在于,所述糖类、所述甘露醇和所述山梨醇的重量比为5~6∶1~2∶3。
9.根据权利要求1所述的冻干保护液,其特征在于,所述糖类包括选自蔗糖、果糖、乳糖、半乳糖、海藻糖或葡萄糖中的一种或多种的组合;和/或,所述增稠剂包括聚乙烯吡咯烷酮;和/或,所述防腐剂包括硫柳汞和/或叠氮钠;和/或,所述赋形剂、所述增稠剂及所述防腐剂在所述冻干保护液中的重量百分比分别为1%~20%、0.5%~5%、0.01%~0.1%,所述冻干保护液的其余成分包括无菌水和PBS缓冲液。
10.根据权利要求1所述的冻干保护液,其特征在于,所述冻干保护液通过如下步骤制得:
配制糖类的PBS溶液;
配制甘露醇的PBS溶液;
配制山梨醇的PBS溶液;
将增稠剂和防腐剂溶于PBS缓冲液中配制增稠防腐剂溶液;
上述4种溶液经过滤膜过滤除菌,将糖类PBS溶液、甘露醇PBS溶液和山梨醇PBS溶液按照比例混合为混合液,再与等体积的增稠防腐剂溶液混合,制得所述冻干保护液。
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