[发明专利]人胶质母细胞瘤细胞系GWH04及其培养方法与应用

权利要求书

1.一种人胶质母细胞瘤细胞系GWH04，其特征在于，它是保藏于中国典型培养物保藏中心CCTCC，保藏号CCTCC NO.C202163的人胶质母细胞瘤细胞系GWH04。

2.根据权利要求1所述人胶质母细胞瘤细胞系GWH04，其特征在于，它为来源于一位右侧颞叶占位胶质母细胞瘤患者的肿瘤组织进行体外培养的细胞和/或子代细胞。

3.根据权利要求2所述人胶质母细胞瘤细胞系GWH04，其特征在于，所述子代细胞包括保藏于中国典型培养物保藏中心CCTCC，保藏号CCTCC NO.C202164的单克隆细胞珠GWH317。

4.一种人胶质母细胞瘤细胞系GWH04的培养方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)取材：术中留取胶质母细胞瘤患者的肿瘤组织0.5cm³于含DMEM的无菌取样管中，置于4℃冰盒中并快速送到实验室；

2)消化：在无菌超净台中用PBS清洗弃去步骤1)所得样本表面残余血细胞后，在平皿中用剪刀将组织反复剪碎，加入高糖DMEM培养基3mL，继续剪碎组织至1～2mm颗粒状，加入3mL含EDTA的胰酶继续吹打混匀，并移至15mL离心管内，在4℃摇床中，快速振摇20分钟；

3)过滤：用不小于200目网径的滤网过滤步骤2)所得悬液，并离心、沉淀，用5mL培养基重悬，所述培养基内包含高糖DMEM+10％FBS，然后转移至T25培养瓶培养，次晨换液；

4)常规传代培养：T25培养瓶细胞长满后，用1mL含EDTA的胰酶室温消化2～3min后，培养基中和，控制离心条件为1000r/min，5min离心处理后，继续1:5传代。

5.一种权利要求2所述人胶质母细胞瘤细胞系GWH04的用途，其特征在于，它包括人胶质母细胞瘤细胞和/或子代细胞在哺乳动物中产生胶质瘤瘤块并用来研究胶质瘤发生机理及耐药机理。

6.根据权利要求5所述人胶质母细胞瘤细胞系GWH04的用途，其特征在于，所述哺乳动物是免疫缺陷小鼠。

7.一种人胶质母细胞瘤细胞系GWH04在制备用于筛选治疗胶质瘤药物中的应用。

8.根据权利要求7所述人胶质母细胞瘤细胞系GWH04在制备用于筛选治疗胶质瘤药物中的应用，其特征在于，它包括建立胶质瘤动物模型并用来筛选胶质瘤治疗药物。

9.根据权利要求7或8所述人胶质母细胞瘤细胞系GWH04在制备用于筛选治疗胶质瘤药物中的应用，其特征在于，将测试化合物施用于体外细胞模型中，施用后抑制细胞增殖或导致细胞凋亡的测试化合物为治疗人胶质母细胞瘤的候选化合物。