[发明专利]伏马毒素B1的检测方法及生物传感器、试剂盒的制备方法及其应用

说明书

本发明提供用于检测伏马毒素B1的生物传感器，由上转换纳米材料和氧化石墨烯组成；还提供用于检测伏马毒素B1的试剂盒，由所述生物传感器和FB1标准品组成；还提供所述生物传感器和试剂盒的制备方法及应用。同时，还提供伏马毒素B1的检测方法，根据标准曲线计算待测样品中FB1的浓度；还包括磁性微球上连接FB1适配体及其互补DNA(cDNA)、由cDNA引发的催化发夹自组装扩增、ssDNA‑UCNPs连接扩增产物、氧化石墨烯淬灭UCNPs的荧光。优选检测待测样品时采用所述生物传感器或所述试剂盒。本发明提供了一种高效、灵敏、便捷的上转换荧光适配体传感技术以检测食品中微量的FB1，同时验证了核酸信号放大策略可高效应用于食品安全检测领域。

技术领域

本发明涉及分析检测技术领域，具体讲，涉及用于检测伏马毒素 B1的生物传感器、试剂盒及其制备方法和应用及伏马毒素B1的检测方法。

背景技术

真菌毒素是真菌在适宜的温湿度条件下，产生的具有致病性和致死性的次级代谢产物，每年全世界的粮食产量约有1/4受真菌毒素污染，直接经济损失达上千亿美元。真菌毒素可以产生于粮食作物生长的每一时期，在仓储以及加工期内都有一定的污染风险。其中，由串珠镰刀菌(F.moniliforme)和再育镰刀菌(F.proliferatum)等镰刀菌产生的伏马毒素(Fumonisin，FB)是玉米、小麦、燕麦及其制品中标志性的真菌毒素，其中伏马毒素B1(FB1)被国际癌症研究机构(International Agency for Research on Cancer，IARC)列为对人类可能的致癌物质(Group 2B)，一些研究发现人类食管癌患病率与该区域内作物所含的FB1存在密不可分的联系。

在人类生产生活中，发生FB1污染的概率比较大，并且FB1具有结合其他真菌毒素的能力，进一步扩大了对人体的危害。因此，对食品中FB1进行高灵敏检测，是一个亟待深入解决的问题。传统的FB1 定量分析方法包括LC-MS、HPLC-FLD和ELISA，这些方法具有很高的灵敏度，但也存在一定的缺陷，如需要昂贵的仪器、复杂的前处理以及繁琐的操作，限制了在实际检测中的应用。

公开号为CN113092766A的中国发明专利申请提供了一种多种真菌毒素的检测试剂盒，其制备方法及检测方法和应用。试剂盒包括：分别偶联有待测真菌毒素抗原的上转换纳米颗粒、分别偶联有待测真菌毒素抗体的磁性纳米颗粒、真菌毒素的标准品溶液；待测真菌毒素至少包括玉米赤霉烯酮和伏马毒素B1。但是其仍然存在灵敏度低的问题。

发明内容

为了克服上述现有技术中灵敏度低的技术问题，本发明提供用于检测伏马毒素B1的生物传感器、试剂盒及其制备方法和应用及伏马毒素B1的检测方法。本发明可高效、灵敏、便捷的检测食品中微量的FB1。

第一方面，本发明提供用于检测伏马毒素B1的生物传感器，由上转换纳米材料(UCNPs)和氧化石墨烯(GO)组成。

优选的是，所述上转换纳米材料选自纳米颗粒。

上述任一方案优选的是，所述上转换纳米材料粒径为25-30nm。

上述任一方案优选的是，所述生物传感器制成或包装成试剂盒。

第二方面，本发明提供用于检测伏马毒素B1的试剂盒，由所述生物传感器和FB1标准品组成。

优选的是，所述标准品为一系列浓度梯度的标准品溶液。

上述任一方案优选的是，所述标准品浓度为0.032-500ng/mL。

上述任一方案优选的是，所述标准品浓度为0.032、0.16、0.8、 4、20、100、500ng/mL。

第三方面，本发明提供所述生物传感器或试剂盒的制备方法：

步骤一，合成磁性微球并对其进行表面修饰；

步骤二，合成上转换纳米材料并对其进行表面修饰；