[发明专利]一种两性霉素B的杂质A或杂质B的分离纯化方法

权利要求书

1.一种两性霉素B的杂质A或杂质B的分离纯化方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)对两性霉素B进行预处理，得到两性霉素B的杂质溶液；

(2)在动态轴向压缩制备色谱中，以柠檬酸水溶液/乙腈为流动相进行洗脱，收集目标杂质馏分，然后经过减压浓缩，得到两性霉素B杂质浓缩液；

(3)以水/乙腈为流动相平衡色谱柱，改变流动相比例，将步骤(2)中得到的两性霉素B杂质浓缩液进行再洗脱除盐，收集目标馏分；

(4)将步骤(3)收集的馏分进行减压蒸馏，除去大部分溶剂后，然后进行冷冻干燥，得到两性霉素B的杂质A或杂质B。

2.根据权利要求1所述的两性霉素B的杂质A或杂质B的分离纯化方法，其特征在于，两性霉素B的杂质为杂质A；

步骤(1)中，所述预处理包括：

在两性霉素B中加入NMP、乙腈和浓盐酸，超声搅拌至完全溶解，避光破坏20～40min后，再加入乙酸铵溶液。

3.根据权利要求2所述的两性霉素B的杂质C或杂质E的分离纯化方法，其特征在于，步骤(2)中，流动相比例：0.01～0.03M柠檬酸水溶液与乙腈体积比为65～75:25～35；检测波长：383nm和303nm；流速：45～55mL/min；进样体积：200mL；采用50DAC制备液相色谱进行制备。

4.根据权利要求1所述的两性霉素B的杂质A或杂质B的分离纯化方法，其特征在于，两性霉素B的杂质为杂质B；

步骤(1)中，所述预处理包括：

在两性霉素B中加入NMP、甲醇和浓盐酸，超声搅拌至完全溶解，避光破坏20～40min后，再加入乙酸铵溶液。

5.根据权利要求4所述的两性霉素B的杂质A或杂质B的分离纯化方法，其特征在于，步骤(2)中，流动相比例：0.01～0.03M柠檬酸水溶液与乙腈的体积比为60～70:30～40；检测波长：383nm；流速：45～55mL/min；进样体积200mL；采用50DAC制备液相色谱制备。

6.根据权利要求1～5任一项所述的两性霉素B的杂质A或杂质B的分离纯化方法，其特征在于，步骤(3)中，平衡色谱柱时，水和乙腈的体积比为85～95：5～15；

洗脱时，水和乙腈的体积比为60～70：30～40。