[发明专利]一种用于检测非梗阻性无精子症的生物标志物及其应用在审
| 申请号： | 202111643968.2 | 申请日： | 2021-12-29 |
| 公开（公告）号： | CN114354944A | 公开（公告）日： | 2022-04-15 |
| 发明（设计）人： | 赵亮宇;汤育新;戴英波;叶昆;周骏;王紫 | 申请（专利权）人： | 中山大学附属第五医院 |
| 主分类号： | G01N33/68 | 分类号： | G01N33/68 |
| 代理公司： | 北京品源专利代理有限公司 11332 | 代理人： | 赵颖 |
| 地址： | 519000 *** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 检测 梗阻 精子 生物 标志 及其 应用 | ||
1.一种用于检测非梗阻性无精子症的生物标志物，其特征在于，所述生物标志物包括TNF-α蛋白。
2.根据权利要求1所述的生物标志物，其特征在于，所述TNF-α蛋白的氨基酸序列包括SEQ ID NO.1所示的序列。
3.权利要求1或2所述的用于检测非梗阻性无精子症的生物标志物在制备非梗阻性无精子症诊断或监测产品中的应用。
4.一种非梗阻性无精子症诊断或监测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括TNF-α蛋白的抗体。
5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括TNF-α蛋白标准品、多孔板、洗涤液、稀释液、显色剂和终止液。
6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述多孔板包括96孔板；
优选地，所述洗涤液包括磷酸盐缓冲液；
优选地，所述显色剂包括TMB底物溶液；
优选地，所述终止液包括硫酸。
7.根据权利要求4-6任一项所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒的使用方法包括：
收集精液样本，以酶联免疫吸附法检测精液样本中TNF-α蛋白的浓度，根据所述TNF-α蛋白的浓度判断是否为非梗阻性无精子症阳性。
8.根据权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒的使用方法包括以下步骤：
(1)收集精液样本并进行预处理；
(2)使用TNF-α蛋白的抗体包被多孔板；
(3)按酶联免疫吸附法，检测所述精液样本中TNF-α蛋白的浓度，根据所述TNF-α蛋白的浓度判断是否为非梗阻性无精子症阳性。
9.根据权利要求8所述的试剂盒，其特征在于，步骤(1)所述预处理包括将所述精液样本置于35～38℃液化25～35min，离心收集上清液并进行过滤；
优选地，步骤(2)所述包被多孔板包括使用磷酸盐缓冲液稀释TNF-α蛋白的抗体，将稀释后TNF-α蛋白的抗体加入多孔板，于4～8℃放置12～16h，使用牛血清白蛋白封闭。
10.根据所述权利要求4-9任一项所述的试剂盒，其特征在于，所述非梗阻性无精子症阳性的判断标准为精液样本中TNF-α蛋白的浓度低于42.30pg/mL。
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