[发明专利]一种用于检测非梗阻性无精子症的生物标志物及其应用

说明书

本发明公开了一种用于检测非梗阻性无精子症的生物标志物及其应用。所述生物标志物包括TNF‑α蛋白。本发明首次发现NOA患者精液中Wnt受体抑制蛋白TNF‑α的浓度显著低于正常男性，并提出TNF‑α蛋白可作为评估NOA患者生精功能障碍的潜在预警分子，有助于扩充诊断NOA指标，以扩大诊断范围，对于NOA诊断领域具有重要意义。

技术领域

本发明属于生殖医学技术领域，涉及一种用于检测非梗阻性无精子症的生物标志物及其应用。

背景技术

无精子症的发生率占男性不育症的10％-20％。根据睾丸中有无精子可分为两类：一类是睾丸具有正常精子发生的阻塞性无精子症(obstructive azoospermia，OA)，另一类是睾丸精子发生障碍的非阻塞性无精子症(non-obstructive azoospermia，NOA)。对非阻塞性无精症的准确诊断可以为临床医生提供有价值的指导。

睾丸体积，血清卵泡刺激素(FSH)水平等可辅助诊断NOA患者，亦有报道以RNA作为NOA的标志物，如CN113215246A公开了一种非梗阻性无精子症诊断的circRNA标志物及其应用，通过实验证实与生精功能正常的对照组相比，非梗阻性无精子症患者血清中的hsa_circMAN1A2表达明显升高，且血清中hsa_circMAN1A2的相对表达量对于非梗阻性无极精子症的预测效能较大。因此，hsa_circMAN1A2能够作为非梗阻性无精子症诊断的circRNA标志物；CN112176052A公开了一种与非梗阻性无精子症诊断相关的血浆外泌体tsRNA标志物及其应用，该标志物为tRF-Gly-GCC-002，其在非梗阻性无精子症和梗阻性无精子症患者血浆中差异表达，能够较好地诊断非梗阻性无精子症，可见，目前已开发出多种诊断NOA指标，但是这些指标主要集中于非编码RNA，其定量检测较为困难，仍有一部分患者无法利用这些指标进行正确的诊断。

综上所述，开发新的与非梗阻性无精子症相关的生物标志物，尤其是蛋白质分子标志物，以扩充诊断NOA指标，对于NOA诊断领域具有重要意义。

发明内容

针对现有技术的不足和实际需求，本发明提供一种用于检测非梗阻性无精子症的生物标志物及其应用，本发明首次发现精液中TNF-α蛋白的浓度与非阻塞性无精子症相关，提示TNF-α蛋白可作为评估非阻塞性无精子症(NOA)患者生精功能障碍的潜在预警分子。

为达上述目的，本发明采用以下技术方案：

第一方面，本发明提供一种用于检测非梗阻性无精子症的生物标志物，所述生物标志物包括TNF-α蛋白。

本发明中，结合测序数据与临床样本，对NOA睾丸巨噬细胞相关的差异性分泌蛋白进行筛选和验证，首次发现NOA患者精液中Wnt受体抑制蛋白TNF-α的浓度显著低于正常男性，并提出TNF-α蛋白可作为评估NOA患者生精功能障碍的潜在预警分子，有助于扩充诊断NOA指标，以扩大诊断范围，对于NOA诊断领域具有重要意义。

优选地，所述TNF-α蛋白的氨基酸序列包括SEQ ID NO.1所示的序列。

SEQ ID NO.1：

MVRSSSRTPSDKPVAHVVANPQAEGQLQWLNRRANALLANGVELRDNQLVVPSEGLYLIYSQVLFKGQGCPSTHVLLTHTISRIAVSYQTKVNLLSAIKSPCQRETPEGAEAKPWYEPIYLGGVFQLEKGDRLSAEINRPDYLDFAESGQVYFGIIAL。

第二方面，本发明提供第一方面所述的用于检测非梗阻性无精子症的生物标志物在制备非梗阻性无精子症诊断或监测产品中的应用。

本发明首次将TNF-α蛋白作为生物标志物应用于制备非梗阻性无精子症诊断或监测产品中，为开发新的非梗阻性无精子症诊断或监测产品提供思路。