[发明专利]凋亡小体在抑制细菌生长中的应用及抑菌方法

权利要求书

1.一种凋亡小体在抑制细菌生长中的应用，其特征在于，凋亡小体通过竞争性的与铁结合，抑制细菌生长过程中的铁摄取。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述凋亡小体为星孢菌素刺激巨噬细胞下产生。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述星孢菌素的刺激浓度为0.25～1.0μM。

4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述凋亡小体的直径大小为900～1100nm。

5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述凋亡小体的制备方法包括：提取并培养所述巨噬细胞；采用所述星孢菌素对所述巨噬细胞进行刺激诱导；提取所述凋亡小体。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述巨噬细胞来源于小鼠骨髓。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述巨噬细胞的制备步骤包括：

对小鼠进行腹腔注射脂多糖，分离小鼠骨髓得到预巨噬细胞；向所述预巨噬细胞中加入红细胞裂解液进行裂解，裂解结束后，加入DMEM高糖培养基以中和残余的红细胞裂解液，过滤，离心；

采用DMEM高糖培养重悬细胞并进行第一次细胞培养，培养6～9小时后，取细胞悬液，离心，用含巨噬细胞集落刺激因子的培养基重悬细胞，进行第二次细胞培养，即得到成熟的巨噬细胞。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述高糖培养基中巨噬细胞集落刺激因子的浓度为25～35ng/ml；和/或

所述重悬液中的巨噬细胞的密度为(1.5～2.5)*10⁶/ml。

9.根据权利要求1或5所述的应用，其特征在于，所述凋亡小体的制备步骤包括：将所述星孢菌素刺激后的巨噬细胞进行离心，收取上清液，离心，收集沉淀，即得到凋亡小体。

10.一种凋亡小体抑制细菌生长的方法，其特征在于，包括：提取并培养巨噬细胞；采用星孢菌素对所述巨噬细胞进行刺激诱导；提取凋亡小体；利用所述凋亡小体与铁结合，进而抑制细菌生长过程中的铁摄取，实现细菌生长的抑制。