[发明专利]凋亡小体在抑制细菌生长中的应用及抑菌方法

说明书

本申请公开了一种凋亡小体在抑制细菌生长中的应用及抑菌方法。所述凋亡小体在抑制细菌生长中的应用，凋亡小体通过竞争性的与铁结合，抑制细菌生长过程中的铁摄取。本申请的应用利用凋亡小体可以在细菌的生长或感染过程中干预细菌的铁摄取机制，实现了抑制细菌的生长，进而降低了致病菌对人类的危害。

技术领域

本申请涉及生物技术领域，具体涉及一种凋亡小体在抑制细菌生长中的应用。

背景技术

致病菌或条件致病菌侵入血循环中生长繁殖，产生毒素和炎性分子，会引起急性全身性感染，对于老人、儿童、有慢性病或免疫功能低下者、治疗不及时及有并发症者，可发展为败血症或者脓毒血症，如果不治疗，死亡率很高。但是，对于缺乏经验的医生，不合理不规范的抗生素的处方均与高死亡率有关。

因此，亟需提供一种新的有效的方案，能够在抗生素治疗外，有效的抑制细菌的生长。

发明内容

为克服现有技术的不足，本申请提供了一种凋亡小体(apoptosis body，AB)在抑制细菌生长中的应用，采用的凋亡小体可以在细菌的生长或感染过程中干预细菌的铁摄取机制，进而降低了致病菌对人类的危害。

本申请实施例提供一种凋亡小体在抑制细菌生长中的应用，所述凋亡小体通过竞争性的与铁结合，抑制细菌生长过程中的铁摄取。

可选的，在本申请的一些实施例中，所述凋亡小体为星孢菌素刺激巨噬细胞下产生。

可选的，在本申请的一些实施例中，所述星孢菌素的刺激浓度为0.25～1.0μM。例如，所述星孢菌素的刺激浓度可以为0.25μM、0.5μM或1.0μM。

可选的，在本申请的一些实施例中，所述凋亡小体的直径大小为900～1100nm；优选地，所述凋亡小体的直径大小为1000nm。

可选的，在本申请的一些实施例中，所述凋亡小体的制备方法包括：提取并培养所述巨噬细胞；采用所述星孢菌素对所述巨噬细胞进行刺激诱导；提取所述凋亡小体。

可选的，在本申请的一些实施例中，所述巨噬细胞来源于小鼠骨髓。

可选的，在本申请的一些实施例中，所述巨噬细胞的制备步骤包括：

对小鼠进行腹腔注射脂多糖，分离小鼠骨髓得到预巨噬细胞；向所述预巨噬细胞中加入红细胞裂解液进行裂解，裂解结束后，加入DMEM高糖培养基以中和残余的红细胞裂解液，过滤，离心；

采用DMEM高糖培养重悬细胞并进行第一次细胞培养，培养6～9小时后，取细胞悬液，离心，用含巨噬细胞集落刺激因子的培养基重悬细胞，进行第二次细胞培养，即得到成熟的巨噬细胞。

可选的，在本申请的一些实施例中，所述高糖培养基中巨噬细胞集落刺激因子的浓度为25～35ng/ml。

可选的，在本申请的一些实施例中，所述重悬液中的巨噬细胞的密度为(1.5～2.5)*10⁶/ml。

可选的，在本申请的一些实施例中，所述凋亡小体的制备步骤包括：将所述星孢菌素刺激后的巨噬细胞进行离心，收取上清液，离心，收集沉淀，即得到凋亡小体。

相应的，本申请实施例还提供一种凋亡小体抑制细菌生长的方法，包括：提取并培养巨噬细胞；采用星孢菌素对所述巨噬细胞进行刺激诱导；提取凋亡小体；利用所述凋亡小体与铁结合，进而抑制细菌生长过程中的铁摄取，实现细菌生长的抑制。

本申请的有益效果在于：

本申请的应用可以抑制细菌的生长或感染过程，进而降低了致病菌对人类的危害。本申请利用星孢菌素刺激下产生的凋亡小体能够有效的与铁结合的性质，利用该凋亡小体可以干预细菌的铁摄取的机制，干预了细菌的生长或感染过程，进而降低了致病菌对人类的危害。