[发明专利]一种维生素D类软胶囊中生育酚的检测方法

权利要求书

1.一种维生素D类软胶囊中生育酚的检测方法，其特征在于，所述检测方法采用高效液相色谱法，且以十八烷基键合硅胶为填充剂的色谱柱，以乙腈和水为流动相，进行等度洗脱。

2.根据权利要求1所述的一种维生素D类软胶囊中生育酚的检测方法，其特征在于，所述乙腈和水的体积比为(97-99):(1-3)。

3.根据权利要求1-2任一项所述的维生素D类软胶囊中生育酚的检测方法，其特征在于，具体包括以下步骤：

S1、流动相配制：按体积比量取乙腈和水，并混合均匀；

S2、溶液配制：

S21、稀释剂配制：称取2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚，并用乙腈稀释，配制成浓度为0.05mg/mL的稀释剂，空白溶液即稀释剂；

S22、供试品溶液配制：取维生素D类软胶囊，收集内容物于离心管中，涡旋混合均匀后，称取内容物，并用步骤S21中配制的稀释剂配制成浓度为2-20μg/mL的供试品溶液；

S23、对照品溶液配制：称取生育酚对照品，并用步骤S21中配制的稀释剂溶解和稀释，配制成浓度为800μg/mL的对照储备液；再精密所述对照储备液，采用步骤S21中配制的稀释剂通过两步稀释，配制成浓度为2-20μg/mL的对照品溶液；

S3、进样检测：分别取步骤S21中所述空白溶液、步骤S23中所述对照品溶液和S22中所述供试品溶液进样，采用高效液相色谱法进行色谱数据的采集和分析，确定生育酚的保留时间，按外标法以峰面积计算供试品溶液中生育酚的含量。

4.根据权利要求3所述的一种维生素D类软胶囊中生育酚的检测方法，其特征在于，所述步骤S3的高效液相色谱法中，色谱柱为Agilent Zorbax SB C18，5μm 4.6*150mm或等同色谱柱，柱温为42-48℃。

5.根据权利要求3所述的一种艾地骨化醇软胶囊中生育酚的检测方法，其特征在于，所述步骤S3的高效液相色谱法中，流速为0.9-1.1mL/min。

6.根据权利要求3所述的艾地骨化醇软胶囊中生育酚的检测方法，其特征在于，所述步骤S3的高效液相色谱法中，检测波长为290-294nm，进样量为20-100μL。

7.根据权利要求3所述的维生素D类软胶囊中生育酚的检测方法，其特征在于，所述步骤S23中，两步稀释具体操作包括：精密移取对照储备液3mL，置50mL量瓶，用步骤S21中配制的稀释剂稀释至刻度，摇匀，得到第一次稀释溶液；精密移取上述第一次稀释溶液5mL，置50mL量瓶，用步骤S21中配制的稀释剂稀释至刻度，摇匀，得到对照品溶液。

8.根据权利要求3所述的维生素D类软胶囊中生育酚的检测方法，其特征在于，所述生育酚包括DL-α-生育酚、D-α-生育酚、δ-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚中一种或多种的混合。

9.根据权利要求3所述的艾地骨化醇软胶囊中生育酚的检测方法，其特征在于，所述维生素D类软胶囊包括麦角钙化醇软胶囊、胆钙化醇软胶囊、骨化二醇软胶囊、骨化三醇软胶囊、阿法骨化醇软胶囊、帕立骨化醇软胶囊、艾地骨化醇软胶囊和维生素AD软胶囊中一种。

10.一种权利要求1-9任一项所述的维生素D类软胶囊中生育酚的检测方法用于生育酚的定性或定量检测。