[发明专利]一种共载多西他赛和阿霉素的长循环脂质体的制备方法

权利要求书

1.一种共载多西他赛和阿霉素的长循环脂质体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)将大豆卵磷脂、胆固醇、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000、多西他赛共同加入到茄形烧瓶中，再加入氯仿进行溶解；

(2)减压旋转蒸发处理形成均匀的透明质膜，而后置于真空干燥箱内干燥处理1h；再加入硫酸铵，进行温育处理,完成后得多西他赛长循环脂质体；

(3)对多西他赛长循环脂质体进行探头超声处理后得到混悬液；

(4)将超声所得的多西他赛长循环脂质体混悬液装入透析袋中，然后在0.9％氯化钠溶液中透析处理8h，每2h换液一次，以除去外水相中的硫酸铵，使其脂质体形成内外pH梯度差；

(5)向透析过的多西他赛长循环脂质体中加入盐酸阿霉素水溶液，孵育处理后得到共同包载多西他赛和阿霉素的长循环脂质体；

(6)将制备好的共同包载多西他赛和阿霉素的长循环脂质体再次放入透析袋中，在0.9％氯化钠水溶液中透析处理8h，每2h换液一次，除去游离的阿霉素，再放入含质量浓度0.5％的吐温-80水溶液中透析8h，每2h换液一次，除去游离的多西他赛，即得共同包载多西他赛和阿霉素的长循环脂质体。

2.根据权利要求1所述的一种共载多西他赛和阿霉素的长循环脂质体的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述的大豆卵磷脂和胆固醇对应的重量比为1～5：1；所述的大豆卵磷脂和多西他赛对应的重量比为5～25：1；所述的二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000和大豆卵磷脂的摩尔比为1～5％。

3.根据权利要求2所述的一种共载多西他赛和阿霉素的长循环脂质体的制备方法，其特征在于，所述大豆卵磷脂和胆固醇对应的重量比为3：1；所述大豆卵磷脂和多西他赛对应的重量比为15：1；所述二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000和大豆卵磷脂的摩尔比为2％。

4.根据权利要求1所述的一种共载多西他赛和阿霉素的长循环脂质体的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述的减压旋转蒸发处理时控制温度为48℃、时长为30min；所述硫酸铵的浓度控制为100～300m mol/L；所述硫酸铵加入后控制大豆卵磷脂的浓度为3～28mg/ml；所述温育处理时控制温度为50℃。

5.根据权利要求4所述的一种共载多西他赛和阿霉素的长循环脂质体的制备方法，其特征在于，所述硫酸铵加入后控制大豆卵磷脂的浓度为21mg/ml；所述硫酸铵的浓度控制为250m mol/L。

6.根据权利要求1所述的一种共载多西他赛和阿霉素的长循环脂质体的制备方法，其特征在于，步骤(3)中所述的探头超声的功率为100W；控制超声处理的方式为开5s关5s，共计超声处理60～360s。

7.根据权利要求6所述的一种共载多西他赛和阿霉素的长循环脂质体的制备方法，其特征在于，所述超声处理的时长为210s。

8.根据权利要求1所述的一种共载多西他赛和阿霉素的长循环脂质体的制备方法，其特征在于，步骤(4)和步骤(6)中所述的透析袋的截留分子量均为8000-14000。

9.根据权利要求1所述的一种共载多西他赛和阿霉素的长循环脂质体的制备方法，其特征在于，步骤(5)中所述的阿霉素的添加量是大豆卵磷脂总质量的1/15；所述孵育处理时控制温度为55℃，孵育的时长为15min。