[发明专利]一种肠道病毒检测用试剂

权利要求书

1.一种肠道病毒检测用试剂，其特征在于，该试剂包含了：引物和探针：NR1-F（0.01μl-1μl）,NR1-R（0.01μl-1μl）.NR2-F（0.01μl-1μl）,NR2-R（0.01μl-1μl）,NR1-P（0.01μl-1μl）,NR2-P（0.01μl-1μl）,LZ-F（0.01μl-1μl）,LZ-R（0.01μl-1μl）,LZ-P（0.01μl-1μl）,CDV-F（0.01μl-1μl）,CDV-R（0.01μl-1μl）,CDV-P（0.01μl-1μl）.RP-F1（0.01μl-1μl）,RP-R1（0.01μl-1μl）,RP-P2（0.01μl-1μl）；催化检测反应的酶体系：如FastKing一步法反转录-荧光定量试剂盒（探针法）（天根生物）。

2.根据权利要求1所述的一种肠道病毒检测用试剂,试剂含有的引物和探针对应的的序列(方向5' →3')为：

NR1-F：GGAGCGGAACAAGGTAYTGG；

NR1-R：TCAACGCCCCCAAAGRCTG；

NR2-F：CGACACTATGGAGCCGAGTC；

NR2-R：GATGAACACTGTCGGGCTGA；

NR1-P：FAM- CAAAGTTTGGATCAGGATGGGG-MGB；

NR2-P：FAM-AGCACGTGGGAGGGCGATGG-MGB；

LZ-F：GTTAGACATAACAGCAGATCCAACA；

LZ-R：GCCACCAYYTTTTCCAATTCAC；

LZ-P：VIC- CTAATCCACAAACTGAGAGAATGATGA-MGB；

CDV-F：ACTTCAGCCTGGGGAACAAG；

CDV-R：GACCTGTCTGTGGTTACATCGT；

CDV-P：ROX-TCAGAAAYCCCAC-MGB；

RP-F1：TTAAAAGAGGATTGTCCTGGGC；

RP-R1：GCCAACCTCAGAGGAGACAAA；

RP-P2：CY5-CTTTACCTGAAGATACCTGGGA-MGB。

3.根据权利要求1所述的一种肠道病毒检测用试剂,该检测用试剂浓度为1-100μM。

4.根据权利要求1所述的一种肠道病毒检测用试剂,将该试剂与经样本释放剂处理的待测样本按1：24-149的比例混匀，然后进行RT-PCR反应。

5.根据权利要求4所述的待测样本指的是：粪便样本，呕吐物样本，咽拭子，肛拭子，口腔拭子。

6.根据权利要求4所述的混匀指的是：将混合物在匀浆器上进行剧烈震荡20s，然后停止10s，如此重复三次后，离心将挂在管壁的液体离心到管底。

7.根据权利要求4所述的RT-PCR反应体系指的是：根据权利要求4处理得到的混匀物与“FastKing一步法反转录-荧光定量试剂盒（探针法）（天根生物）”混合，在反应温度为50℃的条件下反应5分钟，1个循环；然后在反应温度为95℃的条件下反应3分钟，1个循环；然后在反应温度为95℃的条件下反应15秒，然后在反应温度为60℃的条件下反应30秒，重复40个循环，进行RT-PCR反应。