[发明专利]一种热启动Taq DNA聚合酶的制备方法在审
| 申请号： | 202111657624.7 | 申请日： | 2021-12-30 |
| 公开（公告）号： | CN114214298A | 公开（公告）日： | 2022-03-22 |
| 发明（设计）人： | 陈子鹏;张惠丹 | 申请（专利权）人： | 苏州译酶生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/12 | 分类号： | C12N9/12;C12N9/96 |
| 代理公司： | 上海九泽律师事务所 31337 | 代理人： | 蔡佳杰 |
| 地址： | 215123 江苏省苏州市*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 启动 taq dna 聚合 制备 方法 | ||
1.一种热启动Taq DNA聚合酶的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤，
步骤一：对Taq DNA聚合酶进行酶活封闭，具体包括以下步骤，
选择5U/uLTaq DNA聚合酶酶液，按照体积比1：99加入1％酸酐修饰液，磁力搅拌器混匀后，室温放置30分钟，4℃静置16小时；
步骤二：对Taq DNA聚合酶进行抗体修饰，具体包括以下步骤，
将步骤一中修饰后的Taq DNA聚合酶酶液和抗Taq DNA聚合酶抗体分别以体积为1：1体积旋涡混合均匀，室温放置30分钟后，置于4℃静置16小时；
步骤三：对TaqDNA聚合酶核酸适配体修饰，具体包括以下步骤，
将步骤二制备的Taq DNA聚合酶酶液和核酸适配体稀释至同一摩尔浓度，分别以体积为1：1体积旋涡混合均匀，室温放置30分钟后，置于4℃静置16小时；
步骤四：对TaqDNA聚合酶进行离子交换层析，具体包括以下步骤，
将步骤三制备的Taq DNA聚合酶酶液进行QHP离子交换层析，
洗脱液A：20mM Tris-HCl，pH＝8.0，25℃，
洗脱液B：20mM Tris-HCl，250mM KCl pH＝8.0，25℃，
洗脱梯度分成三步洗脱，2～8℃层析柜内纯化。
2.根据权利要求1所述的一种热启动Taq DNA聚合酶的制备方法，其特征在于：所述核算适配体的序列如SEQ ID NO.1所示。
3.根据权利要求1所述的一种热启动Taq DNA聚合酶的制备方法，其特征在于：所述步骤三中稀释至同一摩尔浓度的值为：0.5mg/mL。
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