[发明专利]一种筛选人类LncROR基因含量多态性的引物组及检测方法

权利要求书

1.一种筛选人类LncROR基因含量多态性的引物组，其核苷酸序列如IDNO.1～3所示，所述引组物用于筛选人类血清外泌体中都含有的长链非编码RNALncROR基因含量阈值多态性。

2.一种筛选人类LncROR基因含量多态性的检测方法，其特征在于：包括权利要求1所述的引物组，核苷酸序列为IDNO.1～3所示的引组物，以检测时间15或20min的检测线测定需求阈值。

3.根据权利要求2所述的一种筛选人类LncROR基因含量多态性的检测方法，其特征在于：包括如下步骤：

S1.准备浓度分别为300ng/μL、200ng/μL、100ng/μL、50ng/μL、25ng/μL、10ng/μL、1ng/μL、0.1ng/μL、0.01ng/μL、0.001ng/μL、0.0001ng/μL、0.00001ng/μL的逆转录样本ctDNA各2μL；

S2.将11.5μL双蒸水、2μL的浓度为10μM的正向引物IDNO.1、2μL的浓度为10μM的反向引物IDNO.2、0.5μL的浓度为10μM的探针引物IDNO.3、步骤S1的逆转录样本ctDNA、和29.5μL重泡胀缓冲液依次加入到含有冻干扩增酶的EP管中，混匀；

S3.向混匀后的步骤S2所得溶液中加入2.5μL浓度为280mM的醋酸镁溶液，混匀；

S4.步骤S3所得的混合溶液扩增20min；

S5.步骤S4扩增后的溶液按照每20μL产物加入到80μL的测试试纸条缓冲液静置1分钟，静置后插入试纸条检测。

4.根据权利要求2所述的一种筛选人类LncROR基因含量多态性的检测方法，其特征在于：包括如下步骤：

S1.准备浓度分别为300ng/μL、200ng/μL、100ng/μL、50ng/μL、25ng/μL、10ng/μL、1ng/μL、0.1ng/μL、0.01ng/μL、0.001ng/μL、0.0001ng/μL、0.00001ng/μL的逆转录样本ctDNA各2μL；

S2.将11.5μL双蒸水、2μL的浓度为10μM的正向引物IDNO.1、2μL的浓度为10μM的反向引物IDNO.2、0.5μL的浓度为10μM的探针引物IDNO.3、步骤S1的逆转录样本ctDNA、和29.5μL重泡胀缓冲液依次加入到含有冻干扩增酶的EP管中，混匀；

S3.向混匀后的步骤S2所得溶液中加入2.5μL浓度为280mM的醋酸镁溶液，混匀；

S4.步骤S3所得的混合溶液扩增15min；

S5.步骤S4扩增后的溶液按照每20μL产物加入到80μL的测试试纸条缓冲液静置1分钟，静置后插入试纸条检测。

5.根据权利要求1所述的一种筛选人类LncROR基因含量多态性的检测方法，其特征在于：重组酶聚合酶扩增所用试剂与酶均来源于英国TwistDx商品试剂盒。