[发明专利]一种新疆海岛棉毛细管电泳DNA指纹图谱的构建方法及棉花品种鉴定方法

权利要求书

1.一种新疆海岛棉毛细管电泳DNA指纹图谱的构建方法，包括以下步骤：

从已知的定位在染色体上的棉花SSR引物中筛选在不同棉种间有多态性的引物，作为核心引物；

利用所述核心引物对新疆已审定海岛棉品种进行PCR扩增，得到扩增产物；

对所述扩增产物进行毛细管电泳，得到新疆海岛棉毛细管电泳DNA指纹图谱。

2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述核心引物包括：MGHES31、MON_CGR6812、NAU2713a、MON_CGR6012、HAU4022、NAU2631、MUSS422a、HAU2846、HAU2770、HAU0938、NAU3913、NAU6734、NAU3346b、MON_DPL0521、BNL3043、NAU3433、MON_SHIN-1585、NAU5172、MON_DPL0024、MON_SHIN-1494b、NAU2985、HAU3071a、NAU3736b、NBRI_HQ527566、BNL2535b、CCRI596a、NAU3827、NBRI_HQ526730、MON_DPL0504a、HAU1952b、NAU3298、MON_SHIN-1584、Gh330、MON_CGR5007、NAU7182、HAU1496、MON_DPL0502、HAU4748、NAU7049、BNL3031、NBRI_HQ527820、CK988221-PR-ss、HAU4483、NAU3419c、DPL0238、MON_CGR5732、HAU3193和MON_SHIN-1481中的一种或几种。

3.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述新疆已审定海岛棉品种包括：Xinhaimian1、Xinhaimian2、Xinhaimian3、Xinhaimian4、Xinhaimian5、Xinhaimian6、Xinhaimian7、Xinhaimian8、Xinhaimian9、Xinhaimian10、Xinhaimian11、Xinhaimian12、Xinhaimian13、Xinhaimian14、Xinhaimian15、Xinhaimian16、Xinhaimian17、Xinhaimian18、Xinhaimian19、Xinhaimian20、Xinhaimian21、Xinhaimian22、Xinhaimian23、Xinhaimian24、Xinhaimian25、Xinhaimian26、Xinhaimian27、Xinhaimian28、Xinhaimian29、Xinhaimian30、Xinhaimian31、Xinhaimian32、Xinhaimian33、Xinhaimian34、Xinhaimian35、Xinhaimian36、Xinhaimian37、Xinhaimian38、Xinhaimian39、Xinhaimian40、Xinhaimian41、Xinhaimian42、Xinhaimian43、Xinhaimian44、Xinhaimian45、Xinhaimian46、Xinhaimian47、Xinhaimian48、Xinhaimian49、Xinhaimian50、Xinhaimian51、Xinhaimian52、Xinhaimian53、Xinhaimian54、Xinhaimian55、Xinhaimian56、Xinhaimian57、Xinhaimian58、Xinhaimian59、Xinhaimian60、Xinhaimian61、Xinhaimian62和Xinhaimian63中的一种或几种。

4.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述PCR扩增的体系以10μl计，包括以下组分：DNA模板2.5μl、正向引物0.16μl、反向引物0.16μl、dNTP 0.25μl、10×Taqbuffer 1μl、MgCl₂0.8μl、Taq酶0.16μl和ddH₂O 4.97μl。

5.根据权利要求1或4所述的构建方法，其特征在于，所述PCR扩增的程序包括：94℃预变性3min；94℃变性50sec，58℃退火45sec，72℃延伸1min，35个循环；72℃延伸10min。