[发明专利]快速检测乙型肝炎病毒9个基因型的引物、探针、试剂盒和方法在审
| 申请号： | 202111663032.6 | 申请日： | 2021-12-31 |
| 公开（公告）号： | CN114250325A | 公开（公告）日： | 2022-03-29 |
| 发明（设计）人： | 方钟燎;张伟尉;蒋智华 | 申请（专利权）人： | 广西壮族自治区疾病预防控制中心 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11 |
| 代理公司： | 广西中知科创知识产权代理有限公司 45130 | 代理人： | 牙斐颖 |
| 地址： | 530213 广西壮*** | 国省代码： | 广西;45 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 快速 检测 乙型肝炎 病毒 基因型 引物 探针 试剂盒 方法 | ||
1.快速检测乙型肝炎病毒9个基因型的引物对和探针，其特征在于，所述引物对的上游引物HBVWW1的序列如SEQ ID NO.1所示；下游引物HBVWW2的序列如SEQ ID NO.2所示；所述探针HBVWWPR的序列如SEQ ID NO.3所示。
2.如权利要求1所述的引物对和探针，其特征在于，所述乙型肝炎病毒9个基因型为A、B、C、D、E、F、G、H和/或I基因型的一种或多种。
3.权利要求1或2所述的快速检测乙型肝炎病毒9个基因型的引物对和探针在制备检测乙型肝炎病毒9个基因型试剂盒中的用途。
4.一种可检测乙型肝炎病毒9个基因型的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求1或2所述的引物对和探针。
5.如权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括内标为巨细胞病毒DNA及其扩增引物对和内标探针；所述扩增引物对的上游引物CVWW1的序列如SEQ ID NO.4所示；下游引物CVWW2的序列如SEQ ID NO.5所示；所述内标探针CVWWPR的序列如SEQ ID NO.6所示。
6.如权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括核酸释放试剂和PCR缓冲液。
7.如权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述核酸释放剂由0.01～0.5mM地衣素、43～67mM KCl、体积百分比为0.05～1％的SDS，5～100mM EDTA、体积百分比为1.5～3.0％的TritonX-100组成。
8.如权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述PCR缓冲液由3～10mM MgCl2、10～40mM的KCl、5～20mM pH值为7.8～8.0的Tris-HCl缓冲液、0.15～0.25M的海藻糖、体积百分比为1～10％的DMSO、40～55U/ml的DNA聚合酶和2～8U/ml的尿嘧啶-N-糖基化酶组成。
9.非诊断目的用于乙型肝炎病毒9个基因型的检测方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：
(1)在同一PCR反应管中加入核酸释放剂和待检血清样本，反复吹打混匀，置于普通PCR仪中进行核酸裂解、终止核酸裂解并迅速降至4℃；
(2)向步骤(1)降温后的溶液中加入PCR缓冲液、权利要求1所述引物对和探针和权利要求5所述的内标引物对和内标探针进行荧光定量PCR反应。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于广西壮族自治区疾病预防控制中心，未经广西壮族自治区疾病预防控制中心许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/202111663032.6/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
