[发明专利]一种抗人免疫球蛋白κ轻链的单克隆抗体及其制备方法、免疫检测试剂、应用在审
申请号: | 202111667681.3 | 申请日: | 2021-12-31 |
公开(公告)号: | CN114276457A | 公开(公告)日: | 2022-04-05 |
发明(设计)人: | 翟晋豫;张楠;靳冉;王迎利;柴素真;王鑫;秦志洁;陈明涛;李卫娟;齐华;李三华 | 申请(专利权)人: | 河南赛诺特生物技术有限公司 |
主分类号: | C07K16/42 | 分类号: | C07K16/42;G01N33/577;G01N33/68;G01N33/574 |
代理公司: | 郑州睿信知识产权代理有限公司 41119 | 代理人: | 郭佳效 |
地址: | 450001 河南省郑州*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 免疫球蛋白 单克隆抗体 及其 制备 方法 免疫 检测 试剂 应用 | ||
1.一种抗人免疫球蛋白κ轻链的单克隆抗体,其特征在于,其包含氨基酸序列如SEQ IDNO:1-3所示的VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3,和氨基酸序列如SEQ ID NO:4-6所示的VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3。
2.如权利要求1所述的抗人免疫球蛋白κ轻链的单克隆抗体,其特征在于,所述抗人免疫球蛋白κ轻链的单克隆抗体包含氨基酸序列如SEQ ID NO:7所示的重链可变区,和氨基酸序列如SEQ ID NO:8所示的轻链可变区。
3.一种如权利要求1或2所述的抗人免疫球蛋白κ轻链的单克隆抗体的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)使用免疫球蛋白κ轻链免疫原免疫兔子,采集兔外周血,收集兔外周血单个核细胞,分离出抗原特异性B淋巴细胞;
(2)针对步骤(1)得到的抗原特异性B淋巴细胞,经过培养鉴定筛选出阳性细胞孔,进而获取抗体重链、轻链基因,扩增抗体重链、轻链目的基因,经重组、表达获得兔源单克隆抗体。
4.如权利要求3所述的抗人免疫球蛋白κ轻链的单克隆抗体的制备方法,其特征在于,步骤(2)中,在抗体重链、轻链基因5’端均增加一段能够提高表达量的信号区,然后进行所述扩增。
5.如权利要求4所述的抗人免疫球蛋白κ轻链的单克隆抗体的制备方法,其特征在于,所述信号区的核苷酸序列如SEQ ID NO:9所示。
6.如权利要求5所述的抗人免疫球蛋白κ轻链的单克隆抗体的制备方法,其特征在于,步骤(2)中,扩增抗体重链目的基因的上、下游引物分别如SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11所示;扩增抗体轻链目的基因的上、下游引物分别如SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13所示。
7.一种含有如权利要求1或2所述的抗人免疫球蛋白κ轻链的单克隆抗体的免疫检测试剂。
8.一种如权利要求1或2所述的抗人免疫球蛋白κ轻链的单克隆抗体、如权利要求7所述的免疫检测试剂在免疫组化方面的应用。
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