[发明专利]苯甲酸阿格列汀中两种氰基溴苄异构体含量的分析方法

说明书

本发明涉及分析检测技术领域，具体涉及一种苯甲酸阿格列汀中两种氰基溴苄异构体含量的分析方法。所述分析方法利用三重四级‑气质联用仪一次性测定苯甲酸阿格列汀中3‑氰基溴苄和4‑氰基溴苄的含量，采用直接进样，色谱柱采用VF‑624MS毛细管柱，质谱采用MRM模式，以标准曲线法分析3‑氰基溴苄和4‑氰基溴苄的含量。本发明的分析方法克服了两种氰基溴苄同分异构体性质相近、分离困难的难点，且节约了检测时间，检测方法高效、准确。

技术领域

本发明涉及分析检测技术领域，具体涉及一种苯甲酸阿格列汀中两种氰基溴苄异构体含量的分析方法。

背景技术

苯甲酸阿格列汀是一种能高效、高度选择性抑制二肽基肽酶-Ⅳ的降血糖药物，主要用于Ⅱ型糖尿病的治疗。目前苯甲酸阿格列汀在合成过程中，有可能因原料的因素而引入氰基溴苄类基因毒性杂质，而对用药安全性造成影响。

此外，3-氰基溴苄和4-氰基溴苄互为同分异构体，理化性质较为相似，碎片离子一样，为其分离和测定带来了严峻的挑战。

发明内容

本发明要解决的技术问题是：提供一种苯甲酸阿格列汀中两种氰基溴苄异构体含量的分析方法，克服了两种氰基溴苄同分异构体性质相近、分离困难的难点，且节约了检测时间，检测方法高效、准确。

本发明所述的苯甲酸阿格列汀中两种氰基溴苄异构体含量的分析方法，利用三重四级-气质联用仪一次性测定苯甲酸阿格列汀中3-氰基溴苄和4-氰基溴苄的含量，采用直接进样，色谱柱采用VF-624MS毛细管柱，质谱采用MRM模式，以标准曲线法分析3-氰基溴苄和4-氰基溴苄的含量。

具体地，所述苯甲酸阿格列汀中两种氰基溴苄异构体含量的分析方法，包括以下步骤：

(1)设置三重四级-气质联用仪的气相色谱及质谱的参数条件；

(2)将配制好的对照品和供试品溶液置于液相小瓶中，采用直接进样，采集数据，然后进行分析测试；

(3)分析结束之后，利用标准曲线，根据待测供试品溶液中测得3-氰基溴苄和4-氰基溴苄的峰面积计算溶液中3-氰基溴苄和4-氰基溴苄的浓度，进行定量分析。

所述气相色谱的参数条件为：

进样方式为直接进样；

进样量为2μl；

色谱柱为VF-624MS毛细管柱，30m×0.25mm，厚1.4μm；

载气为氦气；

载气流速为1.5ml/min，分流比为5:1；

进样口温度为280℃；

升温程序为以140℃为初始柱温，保持20min，以45℃/min的速率升至260℃，保持5min。

所述质谱的参数条件为：

采用MRM模式，离子对为11689；

接口温度为230℃；

离子源温度为230℃；

溶剂延迟时间为2min。

所述标准曲线是通过配制线性标准溶液，依次注入气质联用仪，以各线性溶液浓度对峰面积作回归曲线。

作为一种优选方案，标准曲线可以采用以下方法制作：

(1)以二氯甲烷为溶剂，配制3-氰基溴苄和4-氰基溴苄2种混标贮备液，浓度为2.2μg/ml；

(2)分别精密量取2.2μg/ml的2种混标贮备液适量，用二氯甲烷稀释制得44ng/ml、110ng/ml、220ng/ml、330ng/ml、440ng/ml的线性溶液；