[发明专利]一种利用高效液相紫外法同时定量检测月桂酰基甲基牛磺酸钠中牛磺酸和甲基牛磺酸的方法

权利要求书

1.一种利用高效液相紫外法同时定量检测月桂酰基甲基牛磺酸钠中牛磺酸和甲基牛磺酸的方法，其特征在于包括以下操作步骤：

(1)称取0.1g甲基牛磺酸标准品和0.1g牛磺酸标准品，一起溶于蒸馏水中，定容至100ml，得到储备液；分别量取0.50mL、1.00mL、2.00mL、4.00mL和8.00mL的储备液，用蒸馏水分别补齐到10ml，加入1ml质量浓度5％的碳酸钠，滴加入1.5ml质量浓度1％的4-硝基溴化苄，边滴边晃动瓶身使充分反应，分别置于55℃的水浴锅中水浴1-3小时，反应结束后，添加0.5ml质量浓度10％磷酸终止反应，蒸馏水定容至50ml，超声去除气泡，用针头过滤器过滤得到一系列标准品样品；

(2)将步骤(1)所得标准品样品进样到高效液相色谱仪中进行高效液相紫外检测，得到牛磺酸和甲基牛磺酸的峰面积；以甲基牛磺酸浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，进行线性回归，得线性方程1为：y＝75.973x–2.727，，相关系数R²＝0.9974；以牛磺酸浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，进行线性回归，得线性方程2为：y＝30.524x–2.868，相关系数R²＝0.9998；

(3)称取0.1-0.2g(精确到0.1mg)月桂酰基甲基牛磺酸钠，置于100ml容量瓶，用蒸馏水补齐10ml，添加10ml乙腈和1ml质量浓度5％的碳酸钠，滴加1ml 4-硝基溴化苄，边滴边晃动瓶身使充分反应，置于55℃的水浴锅中水浴1-3小时，进行衍生化反应；反应结束后，加入0.5ml质量浓度10％磷酸溶液终止反应，再加蒸馏水定容至100ml，超声去除气泡，用针头过滤器过滤得到待测样品；

(4)将步骤(3)所得待测样品进样到高效液相色谱仪中进行高效液相紫外检测，得到牛磺酸和甲基牛磺酸的峰面积；将所得甲基牛磺酸的峰面积代入步骤(2)所述线性方程1中，计算得出甲基牛磺酸的浓度；将所得牛磺酸的峰面积代入步骤(2)所述线性方程2中，计算得出牛磺酸的浓度。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(1)和步骤(3)所述超声的时间为1分钟。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(2)和步骤(4)所述高效液相紫外检测的条件如下：色谱柱选用Agilent SB-C8，检测波长设置为260nm，进样量为20μL；流动相A为乙腈，流动相B为体积比100：900：2的乙腈、水和浓磷酸混合物，流速：1.0mL/min。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：所述色谱柱的柱温为30℃，色谱柱长度250mm，色谱柱内径为4.6mm，色谱柱填料颗粒直径为5μm。

5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：所述流动相A和流动相B在洗脱过程中的体积配比为：先用体积比0:100的流动相A和流动相B洗脱6min，再用体积比70:30的流动相A和流动相B洗脱12min，接着用体积比70:30的流动相A和流动相B洗脱16min。