[发明专利]一种纯化醋酸去氨加压素的方法

权利要求书

1.一种纯化醋酸去氨加压素的方法，其特征在于：该方法将醋酸去氨加压素粗肽溶于纯化水溶液，然后利用十八烷基硅烷键合硅胶填料为固定相，在待纯化样品中加入氢氧化钠，进行两次纯化，得到纯化醋酸去氨加压素；

其具体步骤如下：

（1）将醋酸去氨加压素粗品溶于纯化水溶液中得到醋酸去氨加压素粗肽水溶液，取醋酸去氨加压素水溶液用滤膜过滤除去不溶性颗粒，收集滤液备用；

（2）以十八烷基硅烷键合硅胶填料为固定相，以TFA/乙腈为流动相体系进行预处理，除去醋酸去氨加压素粗品溶液中残留的乙醚或其它高保留的物质；

（3）采用低压蒸馏的方式除去乙腈，得到醋酸去氨加压素第一步样品溶液；

（4）用氢氧化钠水溶液调节第一步样品溶液的pH至6.0－6.9；

（5）以十八烷基硅烷键合硅胶填料为固定相，以氢氧化钠调pH至6.0－6.9的0.1%磷酸为流动相Ａ，以乙腈为流动相Ｂ对样品进行梯度洗脱，纯化得到醋酸去氨加压素纯品。

2.根据权利要求1所述的一种醋酸去氨加压素的纯化方法，其特征在于，步骤（2）中，以十八烷基硅烷键合硅胶填料为固定相，以0.1%TFA/乙腈为流动相体系进行预处理，检测波长为220nm，进行第一次HPLC线性梯度洗脱，除去醋酸去氨加压素粗品溶液中残留的乙醚或其它高保留的物质；收取含有醋酸去氨加压素样品的馏分；固定相的粒度为10μm。

3.根据权利要求2所述的一种醋酸去氨加压素的纯化方法，其特征在于，步骤（2）中，0.1%TFA的制备方法为：取1000mL纯化水，加1mLTFA，混合均匀，得到0.1%TFA。

4.根据权利要求1所述的一种醋酸去氨加压素的纯化方法，其特征在于，步骤（3）中，用旋转蒸发器水浴温度在30~35℃，真空度在-0.09MPa以下除去部分乙腈，得到醋酸去氨加压素第一步样品溶液，样品溶液为酸性。

5.据权利要求1所述的一种醋酸去氨加压素的纯化方法，其特征在于，步骤（4）中，用0.5mol的氢氧化钠水溶液调节第一步样品溶液的pH至6.5。

6.根据权利要求1所述的一种醋酸去氨加压素的纯化方法，其特征在于，步骤（5）中，以十八烷基硅烷键合硅胶填料为固定相，以氢氧化钠调pH至6.5的0.1%磷酸为流动相Ａ，以乙腈为流动相Ｂ进行梯度洗脱，检测波长为220nm，进行第二次HPLC梯度洗脱，收取含有醋酸去氨加压素样品的馏分。

7.根据权利要求1所述的一种醋酸去氨加压素的纯化方法，其特征在于，步骤（5）中，所述流动相Ａ的制备方法为：取1000ml水，加1ml磷酸，用氢氧化钠调节流动相的pH值至6.5得到磷酸盐溶液。

8.一种氢氧化钠水溶液在醋酸去氨加压素纯化中的用途，其特征在于：高效液相法纯化醋酸去氨加压素的过程中，向醋酸去氨加压素溶液样品中添加氢氧化钠与磷酸盐相结合的流动相体系进行梯度洗脱能除去与醋酸去氨加压素理化性质相近的杂质；纯化过程中用氢氧化钠水溶液调节待纯化样品的pH至6.0－6.9，以氢氧化钠调pH至6.0－6.9的0.1%磷酸为流动相Ａ，以乙腈为流动相Ｂ进行梯度洗脱，纯化得到醋酸去氨加压素纯品。

9.根据权利要求8所述的用途，其特征在于：纯化过程中用0.5mol的氢氧化钠水溶液调节待纯化样品的pH至6.5，以氢氧化钠调pH至6.5的0.1%磷酸为流动相Ａ，以乙腈为流动相Ｂ进行梯度洗脱。