[发明专利]一种纯化醋酸去氨加压素的方法

说明书

本发明涉及醋酸去氨加压素的纯化方法，主要解决现有技术分离得到醋酸去氨加压素纯度较低、收率较低、理化性质相近的杂质难去除的技术问题。该方法将粗肽溶于纯化水溶液，然后利用十八烷基硅烷键合硅胶填料为固定相，在待纯化样品中加入氢氧化钠，然后进行纯化，得到了高纯度高质量高收率的醋酸去氨加压素原料药。本发明方法在高效液相法纯化醋酸去氨加压素的过程中，向醋酸去氨加压素溶液样品中添加氢氧化钠，选用十八烷基硅烷键合硅胶填料与磷酸盐流动相相结合的色谱梯度洗脱除去与醋酸去氨加压素理化性质相近的杂质，可一次收到纯度为99.0％以上，收率80.0％的样品；提高了醋酸去氨加压素成品的纯度和收率。

技术领域

本发明涉及肽纯化的领域，特别是一种纯化醋酸去氨加压素的方法。

背景技术

中文名：醋酸醋酸去氨加压素；英文名：desmopressin；肽序：

Mpa-Tyr-Phe-Gln-Asn-Cys-Pro-D-Arg-Gly-NH₂

分子式：C₄₆H₆₄N₁₄O₁₂S₂；精确分子量：1068.4270摩尔分子量：1069.2240化学结构式：

醋酸去氨加压素是人工合成的，由9个氨基酸组成环状九肽,其作用与人体加压素类似，但显著增强了抗利尿作用，而对平滑肌的作用却很弱，因此避免了引起升压的不良作用。其抗利尿作用/加压作用比约为加压素的1200～3000倍，抗利尿作用时间也较加压素长，可达6～24小时。其催产素活性也明显减弱。另外，使用本品高剂量，即按0.3μg/kg静脉或皮下注射，可增加血浆内促凝血因子Ⅷ的活性2～4倍，也可增加血中血管性血友病抗原因子(vWF:Ag)与此同时释出纤维蛋白溶媒原激活剂(t-PA)，故可用于控制或预防某些疾病在小手术时的出血或药物诱发的出血。

醋酸去氨加压素合成物中会产生多种影响样品的纯度和收率的杂质，理化性质相近的杂质更是很难去除，通过现有纯化技术分离得到醋酸去氨加压素样品纯度低，收率低。

发明内容

为解决现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种新的纯化醋酸去氨加压素的方法，该方法可以有效地提高醋酸去氨加压素的纯度和收率。

为了实现上述目标，本发明采用如下的技术方案：

本发明是一种纯化醋酸去氨加压素的方法：该方法将醋酸去氨加压素粗肽溶于纯化水溶液，然后利用十八烷基硅烷键合硅胶填料为固定相，在待纯化样品中加入氢氧化钠，进行两次纯化，得到纯化醋酸去氨加压素。

本发明所述的一种醋酸去氨加压素的纯化方法，进一步优选的技术方案是，其具体步骤如下：

(1)将醋酸去氨加压素粗品溶于纯化水溶液中得到醋酸去氨加压素粗肽水溶液，取醋酸去氨加压素水溶液用滤膜过滤除去不溶性颗粒，收集滤液备用；

(2)以十八烷基硅烷键合硅胶填料为固定相，以TFA/乙腈为流动相体系进行预处理，除去醋酸去氨加压素粗品溶液中残留的乙醚或其它高保留的物质；

(3)采用低压蒸馏的方式除去乙腈，得到醋酸去氨加压素第一步样品溶液；

(4)用的氢氧化钠水溶液调节第一步样品溶液的pH至6.0－6.9；

(5)以十八烷基硅烷键合硅胶填料为固定相，以磷酸，氢氧化钠调pH至6.0－6.9/乙腈为流动相体系，进行纯化得到醋酸去氨加压素纯品。