[发明专利]一种血浆中抗-DCDC2抗体的检测方法在审
| 申请号： | 202111673663.6 | 申请日： | 2021-12-31 |
| 公开（公告）号： | CN115684042A | 公开（公告）日： | 2023-02-03 |
| 发明（设计）人： | 张继伟;赵莹珺;万文泽;魏喻 | 申请（专利权）人： | 上海伊米诺康生物科技有限公司 |
| 主分类号： | G01N21/31 | 分类号： | G01N21/31;G01N21/78;G01N33/535;G01N33/536;G01N33/574 |
| 代理公司： | 上海微策知识产权代理事务所(普通合伙) 31333 | 代理人： | 钟睿 |
| 地址： | 201800 上海市嘉定区*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 血浆 dcdc2 抗体 检测 方法 | ||
1.一种血浆中抗-DCDC2抗体的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)抗原包被：包被液稀释人DCDC2重组蛋白，得到重组蛋白稀释液，加入酶标板中，低温过夜，进行抗原包被；
(2)用PBST缓冲液清洗酶标板，再加入封闭剂，室温封闭；
(3)再用PBST缓冲液清洗酶标板，加入待测血浆，室温孵育；
(4)再用PBST缓冲液清洗酶标板，加入辣根过氧化物酶标记山羊抗人IgG，室温孵育；
(5)再用PBST缓冲液清洗酶标板，加入TMB显色液，孵育后加入TMB显色终止液，用酶标仪于450nm下测定吸光度。
2.根据权利要求1所述的血浆中抗-DCDC2抗体的检测方法，其特征在于，所述步骤(1)中包被液为ELISA包被液，所述步骤(1)中重组蛋白稀释液中重组蛋白的浓度为0.1-25μg/mL。
3.根据权利要求2所述的血浆中抗-DCDC2抗体的检测方法，其特征在于，所述步骤(1)中重组蛋白稀释液中重组蛋白的浓度为0.1-5μg/mL。
4.根据权利要求1所述的血浆中抗-DCDC2抗体的检测方法，其特征在于，所述步骤(2)中封闭剂为含脱脂牛奶的PBST溶液。
5.根据权利要求4所述的血浆中抗-DCDC2抗体的检测方法，其特征在于，所述含脱脂牛奶的PBST溶液中脱脂牛奶的质量浓度为5％。
6.根据权利要求1所述的血浆中抗-DCDC2抗体的检测方法，其特征在于，所述步骤(2)中室温封闭操作所用的封闭时间为1-8h。
7.根据权利要求1所述的血浆中抗-DCDC2抗体的检测方法，其特征在于，所述步骤(3)中室温孵育操作所用的孵育时间为1-3h。
8.根据权利要求1所述的血浆中抗-DCDC2抗体的检测方法，其特征在于，所述步骤(4)中辣根过氧化物酶标记山羊抗人IgG经过包被液稀释，辣根过氧化物酶标记山羊抗人IgG与包被液的体积比为1：(2000-5000)。
9.根据权利要求8所述的血浆中抗-DCDC2抗体的检测方法，其特征在于，所述步骤(4)中室温孵育操作的孵育时间为0.5-2h。
10.根据权利要求1所述的血浆中抗-DCDC2抗体的检测方法，其特征在于，所述步骤(5)中TMB显色液的孵育条件为室温避光，孵育时间为10min。
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