[发明专利]ppc突变体及其在制备L-缬氨酸中的应用

权利要求书

1.一种ppc突变体，是将ppc蛋白质第186位氨基酸残基由甘氨酸突变为其他氨基酸残基得到的蛋白质；

所述ppc蛋白质为如下A1)-A3)中的任一种：

A1)SEQ ID No.2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

A2)将A1)所示的氨基酸序列经过除第186位氨基酸残基以外的一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的与细菌产缬氨酸相关的蛋白质；

A3)来源于细菌且与A1)或A2)具有95％以上同一性且与细菌产缬氨酸相关的蛋白质。

2.根据权利要求1所述的ppc突变体，其特征在于：所述ppc突变体是将ppc蛋白质第186位氨基酸残基由甘氨酸突变为精氨酸得到的蛋白质。

3.与权利要求1所述ppc突变体相关的生物材料，所述生物材料为如下B1)至B4)中的任一种：

B1)编码权利要求1或2所述ppc突变体的核酸分子；

B2)含有B1)所述核酸分子的表达盒；

B3)含有B1)所述核酸分子的重组载体、或含有B2)所述表达盒的重组载体；

B4)含有B1)所述核酸分子的重组微生物、或含有B2)所述表达盒的重组微生物、或含有B3)所述重组载体的重组微生物。

4.根据权利要求3所述的生物材料，其特征在于：所述核酸分子为如下C1)或C2)中的任一种：

C1)核苷酸序列为SEQ ID No.3的DNA分子；

C2)将SEQ ID No.3所示的核苷酸序列经过修饰和/或一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加得到的与C1)所示的DNA分子具有90％以上的同一性，且具有相同功能的DNA分子。

5.ppc蛋白质或与ppc蛋白质相关的生物材料或权利要求1所述的ppc突变体或权利要求2所述的生物材料在如下X1)至X4)中任一种中的应用：

X1)调控细菌缬氨酸产量；

X2)构建产缬氨酸工程菌；

X3)制备缬氨酸；

所述ppc蛋白质为权利要求1中所述ppc蛋白质；

与ppc蛋白质相关的生物材料为如下D1)至D4)中的任一种：

D1)编码所述ppc蛋白质的核酸分子；

D2)含有D1)所述核酸分子的表达盒；

D3)含有D1)所述核酸分子的重组载体、或含有D2)所述表达盒的重组载体；

D4)含有D1)所述核酸分子的重组微生物、或含有D2)所述表达盒的重组微生物、或含有D3)所述重组载体的重组微生物。

6.提高ppc蛋白质或ppc突变体含量和/或活性的物质或提高ppc基因或ppc突变体基因表达量的物质在如下Y1)至Y4)中任一种中的应用：

Y1)提高细菌缬氨酸产量；

Y2)构建产缬氨酸工程菌；

Y3)制备缬氨酸；

所述ppc蛋白质为权利要求1中所述ppc蛋白质；

所述ppc突变体为权利要求1所述ppc突变体；

所述ppc基因为编码权利要求1中所述ppc蛋白质的基因；

所述ppc突变体基因为编码权利要求1所述ppc突变体的基因。

7.一种提高细菌缬氨酸产量的方法，为如下M1)或M2)：

所述M1)包括如下步骤：将细菌基因组中的ppc基因替换为ppc突变体基因，实现细菌缬氨酸产量的提高；

所述M2)包括如下步骤：提高细菌中ppc蛋白质或ppc突变体含量和/或活性，或提高细菌中ppc基因或ppc突变体基因表达量，实现细菌缬氨酸产量的提高；

所述ppc蛋白质为权利要求1中所述ppc蛋白质；

所述ppc突变体为权利要求1所述ppc突变体；

所述ppc基因为编码权利要求1中所述ppc蛋白质的基因；

所述ppc突变体基因为编码权利要求1所述ppc突变体的基因。