[发明专利]一种生物纸芯片、高通量多联检测微孔板装置、制备方法及用于阴道炎症多联检测的试剂盒

权利要求书

1.一种生物纸芯片，其特征在于：包括亲水区和疏水区，所述亲水区包括定位区和若干检测区；所述疏水区围绕定位区和若干检测区设置，并形成疏水边界；所述若干检测区上设有不同的检测指标底物层，所述定位区上设有指示层，所述指示层用于指示检测区的位置。

2.根据权利要求1所述的生物纸芯片，其特征在于：所述疏水区的厚度大于亲水区的厚度。

3.根据权利要求1所述的生物纸芯片，其特征在于：所述定位区和检测区矩阵分布，所述疏水边界向检测区和定位区的中心凹陷。

4.根据权利要求1所述的生物纸芯片，其特征在于：所述定位区和检测区沿纸芯片边缘呈圆周均匀分布，所述疏水边界向检测区和定位区的中心凹陷。

5.根据权利要求1所述的生物纸芯片，其特征在于：所述检测区设有4个或5个或6个或8个，所述定位区设有1个；所述生物纸芯片的面积为36~40mm²，所述检测区和定位区的面积均为1.7~2.0mm²。

6.根据权利要求1所述的生物纸芯片，其特征在于：所述检测指标底物层为针对过氧化氢、pH值、唾液酸酐酶、白细胞酯酶、乙酰氨基-β-葡萄糖苷酶、脯氨酸氨基肽酶、β-葡萄糖醛酸苷酶、凝固酶检测的底物层。

7.根据权利要求6所述的生物纸芯片，其特征在于：

所述氧化氢底物层包括氧化物酶、4-氨基安替比林、2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸；

所述pH检测底物层为溴甲酚绿；

所述唾液酸苷酶检测底物层包括5-溴-4-氯-3-吲哚神经氨酸盐和2-甲氧基-4-吗啉重氮苯氯化锌；

所述白细胞酯酶检测底物层为5-溴-4-氯-3-吲哚乙酸盐；

所述乙酰氨基-β-葡萄糖苷酶底物层为4-硝基苯基-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷；

所述脯氨酸氨基肽酶底物层为L-脯氨酸对硝基苯胺三氟乙酸盐；

所述β-葡萄糖醛酸苷酶底物层为5-溴-4-氯-3-吲哚葡萄糖醛酸苷盐；

所述凝固酶检测底物层包括甘氨酰-精氨酰-4-甲氧基-β-萘酰胺盐酸盐和2-甲氧基-4-吗啉重氮苯氯化锌。

8.一种高通量多联检测微孔板装置，其特征在于，包括多孔微孔板和权利要求1-7任一所述的生物纸芯片，所述生物纸芯片嵌设在多孔微孔板的单微孔内。

9.一种高通量多联检测微孔板装置的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

绘图，绘制纸芯片图案；

打印，将绘制的图案通过喷蜡打印在空白滤纸上，图案区域为检测区和定位区；

融蜡，将打印含蜡的滤纸在进行加热，蜡融化并渗透至滤纸，25-28℃冷却，得到含有亲水区和疏水区的预处理纸芯片；

加厚，沿疏水区再喷涂一层蜡，使疏水区的厚度大于亲水区的厚度；

组装，预处理纸芯片嵌置到微孔板的单微孔底部，配制检测底物试剂，并将检测底物试剂喷射在纸芯片上对应的检测区，形成所述检测底物层；将荧光粉或甲基紫喷射到定位区，形成所述指示层；得到权利要求1-7任一所述的生物纸芯片；

干燥，将组装好的微孔板放入37℃培养箱干燥30分钟，25-28℃冷却，得到权利要求8所述的高通量多联检测微孔板装置。

10.一种用于阴道炎症多联检测的试剂盒，包括权利要求1-7任一所述的生物纸芯片；或包含权利要求8所述的高通量多联检测微孔板装置，或包括权利要求9所述方法制作的高通量多联检测微孔板装置。