[发明专利]一种负载双毒素的抗体药物偶联物及其应用

说明书

本发明提供了一种负载双毒素的抗体药物偶联物，通过抗体上半胱氨酸结合位点上将MMAF与另外一种药物单元串联，二者可以发挥显著的协同效应，从而有效的提升杀伤肿瘤细胞的效果，这为开发高效低毒的ADC提供了新方案。

技术领域

本发明涉及抗体药物偶联物领域，具体涉及一种通过一个抗体负载双毒素的抗体药物偶联物。

背景技术

抗体药物偶联物(antibody-drug conjugate，ADC)，是指通过化学连接子(Linker)将具有生物活性的药物(Drug)和抗体(Antibody)连接起来的一类生物药。ADC就像是精确制导武器体系，其中具有生物活性的药物作为杀伤性弹药，在抗体的指引下，精准打击病变细胞。因此，ADC结合了细胞毒药物分子的高效能和抗体高靶向性的双重优点。

截止到2021年3月，全球仅批准了11种抗体偶联药物(如表1所示)，他们均为一个靶点抗体偶联一种毒素分子的ADC分子。由于肿瘤细胞表面上抗原数量有限，有效的ADC活性所需的抗原表达水平根据不同抗原特性而变化。ADC需要至少10⁴个抗原/细胞，以确保能够递送致死数量的细胞毒性药物。理想情况下，ADC的抗体部分所针对的抗原应在肿瘤细胞表面均匀表达且拷贝数较高(10⁵/细胞)。而现实情况为肿瘤细胞表面通常只有有限数量的抗原(大约5000到10⁶个抗原/细胞)，并且ADC理想的平均DAR值为3.5-4(如Brentuximabvedotin的平均DAR值为4、Trastuzumab emtansine的平均DAR值为3.5)，输送到肿瘤细胞的药物量很低，因此对于肿瘤细胞的药效较低，这也被认为是ADC临床失败的主要原因之一。

表1已上市抗体药物偶联物

注：Mylotarg于2000年获批上市后在2010年撤市，后于2017年重新获批上市。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供了一种能够负载双毒素的抗体药物偶联物。具体而言，本发明提供了一种包含下式结构的抗体药物偶联物：

其中：

Ab为抗体或抗原结合片段；

S为所述Ab上的链间二硫键打开后形成的巯基残基中的硫原子；

Aa为包含一个或多个氨基酸的氨基酸单元；

G为可选择的裂解单元；

D₁为MMAF；

D₂是不同于MMAF的第二活性药物单元；

p为选自1、2、3、4、5、6、7、8的整数。

抗体或抗原结合片段Ab与癌症、感染性疾病或自身免疫性疾病相关的抗原或所述抗原的表位具有反应性；可选的，Ab为鼠、嵌合、灵长类动物化、人化、或人单克隆抗体的完整、片段(如Fab、Fab’、F(ab)₂、F(ab’)₂等)或亚片段(如单链构建体等)形式，所述抗体包括双特异性抗体、或多特异性抗体。可选的，Ab为鼠、嵌合、灵长类动物化、人化、或人单克隆抗体的完整形式，且所述的Ab具有人IgG1或者人IgG4抗体的Fc结构域和铰链区结构域或其部分氨基酸突变、替换、缺失形式。

第一活性药物单元D₁为选自奥瑞他汀(auristatin)类细胞毒性剂；优选的，所述的第一活性药物单元D₁含有游离的羧基。