[发明专利]用于处理病毒制剂以降低异质性的系统和方法

说明书

用于降低病毒制剂异质性的方法可以包括从病毒制剂产生病毒离子，反复增加病毒制剂和产生的病毒离子中的至少一种的温度和在所述增加的温度的温育时间段中的至少一种，在所述温度和温育时间段中的至少一种的每次增加时测量至少一些产生的病毒离子的质荷比和电荷量，基于相应的质荷比和电荷量的值确定在所述温度和温育时间段中的至少一种的每次增加时的质谱，以及基于所述质谱确定所述温度和温育时间段中的最佳的一个，它们共同在没有使病毒制剂中的病毒衣壳聚集的情况下最小化或至少降低病毒制剂的异质性。

与相关申请的相互参照

本国际专利申请要求2020年2月3日提交的美国临时专利申请序列号62/969,323的利益和优先权，其公开内容明确地整体引入本文作为参考。

政府权利

本发明是在美国国立卫生研究院（National Institutes of Health）授予的GM131100项下的政府支持的情况下完成的。美国政府对本发明拥有某些权利。

技术领域

本公开内容一般涉及质谱分析法，且更具体地涉及用于在不同温度、温育时间段、加热分布（profile）和/或冷却分布的范围内测量和分析生物混合物颗粒包括但不限于病毒颗粒的质量的仪器和方法。

背景技术

腺伴随病毒（AAV）是基因治疗载体的一个例子，其由于其缺乏致病性、低免疫原性和存在许多具有不同向性的血清型而得到广泛接受。已经发现存在可能与样品制备和包装技术相关的剂量相关的免疫毒性（immunotoxicity）。以降低这种制剂的异质性的方式处理病毒制剂例如但不限于AAV可能是有益的。

发明内容

本公开内容可包括所附权利要求中记载的一个或多个特征，和/或以下特征中的一个或多个及其组合。在第一方面，用于降低病毒制剂异质性的方法可以包括从病毒制剂产生病毒离子，反复增加病毒制剂和产生的病毒离子中的至少一种的温度和在所述增加的温度的温育时间段中的至少一种，在所述温度和温育时间段中的至少一种的每次增加时测量至少一些产生的病毒离子的质荷比和电荷量，基于相应的质荷比和电荷量的值确定在所述温度和温育时间段中的至少一种的每次增加时的质谱，以及基于所述质谱确定所述温度和温育时间段中的最佳的一个，它们共同在没有使病毒制剂中的病毒衣壳聚集的情况下最小化或至少降低病毒制剂的异质性。

第二方面可以包括第一方面的特征，并且可以进一步包括对应于在相应的温育时间段之后降低所述增加的温度的方式改变冷却分布，并且基于质谱确定最佳冷却分布以及温度和温育时间段中的最佳的一个，它们共同在没有使病毒制剂中的病毒衣壳聚集的情况下最小化或至少降低病毒制剂的异质性。

第三方面可以包括第一方面的特征，并且可以进一步包括对应于增加病毒制剂和产生的病毒离子中的至少一种的温度的方式改变加热分布，并且基于质谱确定最佳加热分布以及温度和温育时间段中的最佳的一个，它们共同在没有使病毒制剂中的病毒衣壳聚集的情况下最小化或至少降低病毒制剂的异质性。

第四方面可以包括第三方面的特征，并且可以进一步包括对应于在相应的温育时间段之后降低所述增加的温度的方式改变冷却分布，并且基于质谱确定最佳冷却分布以及最佳加热分布和温度和温育时间段中的最佳的一个，它们共同在没有使病毒制剂中的病毒衣壳聚集的情况下最小化或至少降低病毒制剂的异质性。

第五方面可以包括第一至第四方面中任一项的特征，其中在所述温度和温育时间段中的至少一种的每次增加时测量至少一些产生的病毒离子的质荷比和电荷量使用电荷检测质谱仪进行。

第六方面可以包括第一至第四方面中任一项的特征，其中在所述温度和温育时间段中的至少一种的每次增加时测量至少一些产生的病毒离子的质荷比和电荷量使用质谱仪进行。

第七方面可以包括第一至第六方面中任一项的特征，并且可以进一步包括基于相应质谱中的至少一个感兴趣的质量峰的质量分辨率确定在温度和温育时间段中的至少一种的每次增加时的病毒群体的异质性。