[发明专利]糖基氟化物的合成

权利要求书

1.用于产生目的糖基氟化物的方法，所述方法包括以下步骤：

a)提供外源性前体和遗传修饰细胞，其中能够在所述遗传修饰细胞中对所述外源性前体进行一种或多种糖基化反应，所述遗传修饰细胞包含编码一种或多种糖基转移酶的一种或多种核酸序列，并且其中所述外源性前体是通式I的化合物

X-F

通式I，

其中

X代表糖基部分，

F代表氟原子

并且

X和F通过α或β糖苷键、优选通过α糖苷键连接；

b)在包含所述外源性前体的培养基中培养所述遗传修饰细胞，由此

i.所述外源性前体被所述细胞内化，并且

ii.通过所述一种或多种糖基转移酶对内化的外源性前体或其糖基化衍生物进行一种或多种糖基化反应，以形成所述目的糖基氟化物，

c)任选地从所述遗传修饰细胞和/或从所述培养基中分离所述目的糖基氟化物。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述遗传修饰细胞是酵母细胞或细菌细胞，优选大肠杆菌E.coli细胞。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述一种或多种糖基转移酶包含一种或多种唾液酸转移酶和/或一种或多种岩藻糖基转移酶。

4.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述一种或多种糖基转移酶选自β-1,3-N-乙酰氨基葡萄糖转移酶、β-1,6-N-乙酰氨基葡萄糖转移酶、β-1,3-半乳糖基转移酶、β-1,4-半乳糖基转移酶、β-1,4-N-乙酰氨基半乳糖转移酶、β-1,3-N-乙酰氨基半乳糖转移酶、β-1,3-葡萄糖醛酸转移酶、α-2,3-唾液酸转移酶、α-2,6-唾液酸转移酶、α-2,8-唾液酸转移酶、α-1,2-岩藻糖基转移酶、α-1,3-岩藻糖基转移酶、α-1,4-岩藻糖基转移酶、α-1,4-半乳糖基转移酶、α-1,3-半乳糖基转移酶、或其组合。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中所述外源性前体是通式Ia的化合物：

其中

R₁和R₂独立地选自OH、NH₂和NH-酰基，

并且

R₃和R₄独立地选自CH₂-OH和C_1-6烷基，优选甲基。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的方法，其中所述外源性前体是通式Ib的化合物：

其中R₁和R₂独立地选自OH、NH₂和NH-酰基。

7.根据权利要求1-6中任一项所述的方法，其中所述外源性前体是化合物1a：

其中糖苷键优选为α糖苷键。

8.根据权利要求1-7中任一项所述的方法，其中所述遗传修饰细胞不具有β-半乳糖苷酶活性。

9.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中通式I的X是单糖部分、二糖部分或三糖部分，优选单糖部分或二糖部分。

10.根据权利要求1-5中任一项所述的方法，其中所述目的糖基氟化物是通式IIa的化合物：

其中

R₅和R₇独立地选自OH、NH₂、NH-酰基和O-糖苷；

R₆、R₈和R₉独立地为氢或糖基部分；

并且

R₁₀和R₁₁独立地选自CH₂-OH、CH₂O-糖苷和C_1-6烷基，优选甲基。