[发明专利]由C-1抑制剂耗尽的血浆生产免疫球蛋白制剂的方法

权利要求书

1.一种用于由包含免疫球蛋白G(IgG)的C1-INH耗尽的上清液级分制备IgG富集级分的方法，所述方法包括：

(a)使所述C1-INH耗尽的上清液级分与肝素接触，从而形成肝素化级分；以及

(b)从所述肝素化级分中分离出IgG，从而形成IgG富集级分。

2.如权利要求1所述的方法，其中所述上清液级分是C1-抑制剂吸附后上清液。

3.如权利要求1或2所述的方法，其中所述上清液级分是血浆上清液。

4.如权利要求3所述的方法，其中所述血浆上清液是C1-INH耗尽的冷沉淀物贫乏血浆。

5.如权利要求1-4中任一项所述的方法，其中所述上清液级分被耗尽了选自因子II、VII、IX和X或它们的混合物的其他凝血因子中的一者或多者。

6.如权利要求1-5中任一项所述的方法，其中在进一步加工之前将所述上清液级分浓缩至正常血浆的蛋白质值。

7.如权利要求1-6中任一项所述的方法，其中所述肝素以每ml上清液级分约1至约20单位的量添加。

8.如权利要求7所述的方法，其中所述肝素以每ml上清液级分约5单位的量添加。

9.如权利要求7所述的方法，其中所述肝素以每ml上清液级分约10单位的量添加。

10.如权利要求1-9中任一项所述的方法，其还包括在步骤(a)之前从含有C1-INH的冷沉淀物贫乏血浆级分中去除C1-INH酯酶抑制剂(C1-INH)，从而形成所述C1-INH耗尽的上清液级分。

11.如权利要求1-10中任一项所述的方法，其中所述IgG富集级分含有所述上清液级分中发现的IgG含量的至少约50％。

12.如权利要求1-11中任一项所述的方法，其中所述IgG富集级分中的IgG纯度为至少95％。

13.如权利要求1-12中任一项所述的方法，其中所述在b)中从所述肝素化级分中分离出IgG包括：

(i)在约7.0至7.5的pH下用约6％至约10％乙醇沉淀所述肝素化级分，以获得级分I沉淀物和级分I上清液；以及

(ii)在约6.7至约7.3的pH下用约18％至约27％醇从所述级分I上清液中沉淀IgG以形成级分II+III沉淀物。

14.如权利要求1-12中任一项所述的方法，其中所述在b)中从所述肝素化级分中分离出IgG包括：

(i)在约6.7至约7.3的pH下用约18％至约27％醇从所述肝素化级分中沉淀IgG以形成级分I+II+III沉淀物。

15.如权利要求13或14所述的方法，其还包括：

(iii)将所述级分II+III沉淀物或所述级分I+II+III沉淀物悬浮在悬浮缓冲液中，从而形成IgG悬浮液；

(iv)将细碎的二氧化硅(SiO₂)与所述IgG悬浮液混合至少约30分钟；

(v)过滤所述IgG悬浮液，从而形成滤液和滤饼。