[发明专利]免疫刺激性组合物

权利要求书

1.包含脂质体-核酸复合物的免疫刺激性组合物，其中所述复合物含有

- 脂质体，就其脂质而言，其包含第一脂质和第二脂质或由其组成，其中所述第一脂质是两性离子脂质且所述第二脂质是阳离子脂质；和

- 一种或多种免疫刺激性寡核苷酸和/或一种或多种免疫刺激性多核苷酸。

2.权利要求1的免疫刺激性组合物，其中所述两性离子脂质的电荷归因于存在于所述两性离子脂质中的至少磷酸盐部分和伯胺。

3.权利要求1的免疫刺激性组合物，其中用作第一脂质的两性离子脂质是1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(DOPE)。

4.根据前述权利要求中任一项所述的免疫刺激性组合物，其中用作第二脂质的阳离子脂质选自N-[1-(2,3-二油烯基氧基)丙基]-N,N,N-三甲基氯化铵(DOTMA)、N-[1-(2,3-二油酰基氧基)丙基]-N,N,N-三甲基氯化铵(DOTAP)、二甲基双十八烷基溴化铵(DDAB)、3β-[N-(N',N'-二甲基氨基乙烷)-氨基甲酰基]胆固醇盐酸盐(DC-胆固醇)和其他阳离子胆固醇衍生物、N-(4-羧基苄基)-N,N-二甲基-2,3-双(油酰基氧基)丙-l-铵(DOBAQ)、l-[2-(油酰基氧基)乙基]-2-油烯基-3-(2-羟基乙基)咪唑啉氯化物(DOTIM)及其混合物。

5.根据前述权利要求中任一项所述的免疫刺激性组合物，其中所述第一脂质是DOPE且所述第二脂质是DOTMA或其中所述第一脂质是DOPE且所述第二脂质是DOTAP。

6.根据前述权利要求中任一项所述的免疫刺激性组合物，其中基于所述脂质体中脂质的总重量，至少40 wt.%、优选至少45 wt.%且最优选至少50 wt.%是第一脂质。

7.根据前述权利要求中任一项所述的免疫刺激性组合物，其中所述一种或多种免疫刺激性寡核苷酸选自A-类、B-类和C-类免疫刺激性寡核苷酸及其混合物，且其中优选地所述一种或多种免疫刺激性寡核苷酸选自B-类和C-类免疫刺激性寡核苷酸。

8.根据前述权利要求中任一项所述的免疫刺激性组合物，其中所述一种或多种免疫刺激性寡核苷酸

(i)与SEQ ID NO. 1、SEQ ID NO. 2、SEQ ID NO. 3或SEQ ID NO. 4具有至少75%序列同一性，且优选地与SEQ ID NO. 1或SEQ ID NO. 2具有至少75%序列同一性；或

(ii)选自SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4，且优选地选自SEQID NO.l和SEQ ID NO.2。

9.根据前述权利要求中任一项所述的免疫刺激性组合物，其中所述一种或多种免疫刺激性寡核苷酸中的至少一些磷酸二酯部分已经被化学修饰以增加核酸酶抗性，特别是已经被硫代磷酸酯部分替代。

10.根据前述权利要求中任一项所述的免疫刺激性组合物，其中所述脂质体-寡核苷酸复合物至少平均具有20至600 nm、优选40至500 nm、甚至更优选60至300 nm、还更优选60至250 nm且最优选60至220 nm的直径。

11.用于制备根据权利要求1至10中任一项所述的免疫刺激性组合物的方法，其包括以下步骤：

A. 提供脂质体并使所述脂质体与一种或多种免疫刺激性寡核苷酸和/或一种或多种免疫刺激性多核苷酸接触以形成脂质体-核酸复合物；或

B. 在脂质体形成之前或期间使脂质与所述一种或多种免疫刺激性寡核苷酸和/或一种或多种免疫刺激性多核苷酸接触以形成脂质体-核酸复合物。

12.包含脂质体-核酸复合物的免疫刺激性组合物中的两性离子脂质用于诱导I型干扰素免疫应答和/或减少或绕过TLR-介导的免疫应答的用途。