[发明专利]视神经萎缩的治疗

说明书

一种用于调节OPA1基因转录物或其部分的mRNA翻译的经分离或经纯化的反义寡聚物，所述OPA1基因转录物或其部分具有经修饰的骨架结构和与所述经分离或经纯化的反义寡聚物具有至少75％的序列同一性的序列。

技术领域

本发明涉及使用反义寡聚物治疗、预防或改善由基因OPA1中的突变引起的影响。

背景技术

常染色体显性视神经萎缩(ADOA)是世界上最常见的遗传性视神经病变，估计患病率在10,000分之一至50,000分之一的范围之间。OPA1是大多数患有ADOA的家族的主要致病基因。

ADOA通常在儿童早期出现进行性视力衰竭，选择性视网膜神经节细胞丢失是其定义的病理特征。视力衰竭的平均发病年龄为7岁，范围为1至16岁。80％的受影响个体在年龄10岁之前出现症状。在高达20％的病例中，ADOA与其他临床表现相关，最常见的是感觉神经性聋、共济失调、肌病和进行性外眼肌麻痹。已通过细胞色素c氧化酶(COX)缺陷肌纤维的鉴定和这些患者的骨骼肌活检中的多个mtDNA缺失突出强调了这些综合征性ADOA变体的重要性，暗示OPA1在线粒体DNA维持中的作用。

OPA1由30个外显子组成，跨越3号染色体(3q28-q29)长臂上100kb的基因组DNA，并且蛋白质产物是一种共定位于线粒体内膜上的960个氨基酸的多肽。OPA1包含由机械酶的发动蛋白超家族成员共享的一个高度保守的功能性GTP酶(GTPase)结构域，并且调控几个重要的细胞过程，包括线粒体网络的稳定性。据报道，超过400种不同的OPA1突变导致视神经变性和视力丧失，范围从孤立的“显性视神经萎缩”(DOA；OMIM#165500)到名称为‘DOAplus’(OMIM#125250)的更严重的多系统综合征，包括患有贝尔综合征(Behr Syndrom)(OMIM#210000)的一些双等位基因病例。

OPA1是一种普遍表达的线粒体GTP酶，其对于线粒体功能而言是必不可少的。在人类中，OPA1经由外显子4、4b和5b的差异剪接产生至少八种变体。通过其线粒体靶向序列(MTS)靶向OPA1前体蛋白并将其动员到线粒体。在线粒体中，OPA1前体蛋白被切割成锚定在线粒体内膜的长形式(1形式)或切割成短的可溶形式(s形式)。

完整的OPA1基因的编码序列超出了具有小于5kb限值的AAV载体的容量。此外，CRISPR/Cas9基因校正将需要针对每个家族的OPA1突变的不同产品。此外，基因替换和基因编辑方法两者都需要视网膜下注射病毒载体以实现充分的转染。这会带来视网膜创伤的风险。

需要为ADOA提供新型治疗或预防措施，或者至少提供补充先前已知治疗的方法。本发明试图提供一种用于治疗、预防或改善ADOA的影响的改进或替代方法。

背景的先前讨论仅仅意在便于理解本发明。所述讨论并不承认或认可所提及的任何材料在本申请的优先权日是或曾经是公知常识的一部分。

发明内容

本发明提供了提高功能性OPA1蛋白表达水平的手段。优选地，功能增加的OPA1存在于患有ADOA的患者中，更优选地存在于涉及OPA1单倍剂量不足的ADOA中。

广义上，根据本发明的一方面，提供了一种经分离或经纯化的反义寡聚物，其靶向OPA1基因转录物的5′UTR。优选地，提供了经分离或经纯化的反义寡聚物以通过5′UTR二级结构元件的空间抑制和/或上游开放阅读框的抑制来增加功能性OPA1蛋白的翻译。优选地，提供了一种用于诱导OPA1蛋白或其部分的产生增加的经分离或经纯化的反义寡聚物。

在本发明的一方面，提供了一种具有10个至50个核苷酸的反义寡聚物，其包含与OPA1基因转录物或其部分的5′UTR附近或之内的区域互补的靶向序列。在本发明的另一方面，提供了一种具有10个至50个核苷酸的反义寡聚物，其包含与OPA1基因转录物或其部分的外显子附近或之内的区域互补的靶向序列。