[发明专利]一种利福平中有关物质的检测方法

说明书

本发明涉及药物分析技术领域，具体公开一种利福平中有关物质的检测方法。所述方法包括：配制供试品溶液和对照品溶液，采用液相色谱‑质谱联用法进行检测，所述液相色谱采用C18色谱柱，以体积浓度为0.8‰~1.2‰的甲酸水溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，梯度洗脱；所述质谱采用ESI离子源，正离子检测，SIM模式。本申请提供的检测方法具有方法简便、稳定、精密度高、重现性好等优点，能够快速、准确地对利福平原料药中的杂质N‑甲基哌嗪和1‑氨基‑4‑甲基哌嗪进行检测，整个操作过程可靠、可控，适于实际应用和推广，具有广阔的应用前景。

技术领域

本发明涉及药物分析技术领域，尤其涉及一种利福平中有关物质的检测方法。

背景技术

利福平(Rifampicin)，分子式为C₄₃H₅₈N₄O₁₂，发明于1965年，是利福霉素类半合成广谱抗生素，为一重要抗结核药物。利福平的发现使结核病的治疗又发生了一次更大的飞跃，它除对结核杆菌具有很高的活性外；对金黄色葡萄球菌、非肠球菌型的链球菌及单核细胞增生利斯特氏菌等也具有很高的活性；它对非肺结核包括结核性脑膜炎也是最有效的治疗药物。

在现有工艺合成利福平原料药的过程中可能会引入副产物或未反应的原料，如N-甲基哌嗪和1-氨基-4-甲基哌嗪，且目前并没有相关文献报道N-甲基哌嗪和1-氨基-4-甲基哌嗪的检测方法。因此，开发一种能够实现对N-甲基哌嗪和1-氨基-4-甲基哌嗪的检测方法，对提高用药安全和利福平的质量控制具有重要意义。

发明内容

鉴于此，本申请提供一种利福平中有关物质的检测方法，具有优异的灵敏度、精密度和线性关系，能够满足利福平原料药中N-甲基哌嗪和1-氨基-4-甲基哌嗪的检测。

为达到上述发明目的，本发明实施例采用了如下的技术方案：

一种利福平中有关物质的检测方法，所述检测方法至少包括以下步骤：

步骤一、配制供试品溶液和对照品溶液：

对照品溶液的配制：取N-甲基哌嗪对照品和1-氨基-4-甲基哌嗪对照品，用溶剂配制成对照品溶液；

供试品溶液的配制：取利福平样品，用溶剂配制成供试品溶液；

步骤二、采用液相色谱-质谱联用法对所述供试品溶液和所述对照品溶液进行检测，所述液相色谱的色谱条件为：

采用C18色谱柱，以体积浓度为0.8‰~1.2‰的甲酸水溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，梯度洗脱；

所述质谱采用ESI离子源，正离子检测，SIM模式，干燥器温度为350℃，干燥器流速为12L/min，雾化气压力为45psi，毛细管电压为3500V。

相对于现有技术，本申请提供的利福平中有关物质的检测方法具有以下优势：

本申请提供的利福平中有关物质的检测方法，实现对利福平原料药中N-甲基哌嗪、1-氨基-4-甲基哌嗪的定量和定性分析，该方法专属性强，检测限低，N-甲基哌嗪的检测限为0.203µg/mL，定量限为0.508µg/mL，1-氨基-4-甲基哌嗪的检测限为0.197µg/mL，定量限为0.492µg/mL，满足利福平原料药中N-甲基哌嗪和1-氨基-4-甲基哌嗪的检测要求，而且，其线性关系良好，重复性高，标准曲线的线性范围内的相关系数都大于0.99；此外，该检测方法还具有分析时间快，需样量少的优点，能够大大提高样品分析效率。

本发明采用液相色谱-质谱联用法对利福平中N-甲基哌嗪、1-氨基-4-甲基哌嗪进行检测，具有方法简便、稳定、精密度高、重现性好等优点，能够快速、准确地对利福平原料药中的杂质N-甲基哌嗪、1-氨基-4-甲基哌嗪进行检测，整个操作过程可靠、可控，适于实际应用和推广，具有广阔的应用前景。

可选的，所述梯度洗脱的程序如下：