[发明专利]一种检测寨卡病毒非结构蛋白NS1的ELISA试剂盒

权利要求书

1.一种检测寨卡病毒NS1抗原的ELISA试剂盒,该试剂盒包括捕获抗体和与标记物结合的检测抗体,其特征在于所述的捕获抗体是由NS1特异性重组抗原筛选得到，其标记抗体的标记物可以是生物素、辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶、胶体金或荧光素。

2.权利要求1所述的试剂盒,其特征在于该试剂盒是一种基于双抗体夹心方法的酶联免疫诊断试剂盒,由包被了捕获单抗的微孔反应板、样品处理液、标记了辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶的检测单抗、阳性对照物、阴性对照物、浓缩洗液、显色液和终止液组成,其中所述的显色液中含有辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶的底物。

3.一种寨卡病毒非结构蛋白NS1特异性抗原的筛选及制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一，结合非结构蛋白NS1的同源性、二级结构、抗原性、亲疏水性等信息，筛选出特异性高和抗原性强的6种目的抗原的编码序列；步骤二，利用全化学合成相应肽段，获得寨卡病毒非结构蛋白NS1抗原。所选多肽如下所示：

Pep1：VKNPMWRGPQRLPV；

Pep2：VREDYSLECDPAV；

Pep3：VKNPMWRGPQRLPV；

Pep4：VREDYSLECDPAV；

Pep5：DRYKYHPDSPRRLA；

Pep6：IRPRKEPESNLVRS。

4.根据权利要求1所述的一种检测寨卡病毒非结构蛋白NS1的ELISA试剂盒，其特征在于，所述特异性抗体通过如下方法制备：利用寨卡病毒全长非结构蛋白NS1进行动物免疫，随后进行细胞融合实验，利用筛选得到的6种特异性抗原对有效单克隆进行筛选，后将筛选得到的所有阳性杂交瘤细胞上清进行重组蛋白Western Blot和ELISA验证，利用上述过程获得的阳性克隆抗体进行抗体配对筛选实验，确定出可用于双抗夹心法的ELISA抗体对。

5.根据权利要求1所述的一种检测寨卡病毒非结构蛋白NS1的ELISA试剂盒，其特征在于：所述试剂盒在检测寨卡病毒包膜蛋白E中的应用。