[发明专利]一种有效缩短维生素C一步菌发酵反应周期的方法

说明书

本发明公开了一种有效缩短维生素C一步菌发酵反应周期的方法，该方法包括配制种液，配制发酵培养基，发酵；所述发酵培养基的组分及占比为：山梨醇400g/L，玉米浆1.3‑1.7g/L，碳酸钙0.9‑1.1g/L，酵母膏0.9‑1.1g/L，消泡剂0.25‑0.35g/L；所述配制发酵培养基，先加入1/2山梨醇，剩余山梨醇分别在发酵步骤中山梨醇锤度降至3时分两次加入，后两次的加入量相同；本发明的方法能够使山梨醇浓度达到40%的同时解除高浓度山梨醇对生黑醋酸杆菌的抑制高的问题，同时还能够缩短发酵周期，提高产糖速率，增加OD最大值，增加设备的利用率。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，尤其是涉及一种有效缩短维生素C一步菌发酵反应周期的方法。

背景技术

维生素C在医药和临床方面都具有重要的应用价值，亦广泛用于食品工业和化妆品工业。目前维生素C生产常用方法为“二步发酵法”，第一步发酵中需以山梨醇为底物，但是发酵过程长，操作工艺烦琐，易受杂菌、噬菌体污染等。生产中一步发酵多采用一次投醇，将山梨醇最高浓度控制在35%左右，但是当初始山梨醇浓度较高时，会导致分批发酵的氧化率减少，从而导致山梨糖的产率降低。而且在35%山梨醇浓度下的发酵，存在前期高浓度山梨醇前期对生黑醋酸杆菌抑制高的现象，但是若采用较低浓度山梨醇，则设备利用率低，目前仍没有既可以减少山梨醇前期高抑制，缩短发酵周期，还可以提高设备利用率的有效方法。

发明内容

为解决现有技术中存在的技术问题，本发明提供一种有效缩短维生素C一步菌发酵反应周期的方法，能够使山梨醇浓度达到40%的同时解除高浓度山梨醇对生黑醋酸杆菌的抑制高的问题，同时还能够缩短发酵周期，提高产糖速率，增加OD最大值，增加设备的利用率。

为解决以上技术问题，本发明采取的技术方案如下：

一种有效缩短维生素C一步菌发酵反应周期的方法，包括配制种液，配制发酵培养基，发酵。

所述配制种液，配制一次种液，将一次种液pH调至5-5.5，然后在整个过程不再控制pH,在110-120℃灭菌18-22min后将培养温度降至30-32℃，再接入二次种液，罐压0.035-0.045MPa，通气量4.8-5.2L/min，转速290-310rpm，待糖量达到60-70mg/ml时，得到种液。

所述一次种液与二次种液的体积比为65:8-12。

所述一次种液和二次种液的组成为：山梨醇190-210g/l；玉米浆干粉4-6g/l；硫酸铵0.9-1.1g/l；磷酸二氢钾0.9-1.1g/l；种液的OD值为3-4。

所述一次种液和二次种液中的菌种为生黑醋酸杆菌，菌种保藏号为GDMCC No：61006。

所述配制发酵培养基，使用自来水配制发酵培养基，再将PH调至4.8-5.2后在113-117℃下对发酵罐培养基灭菌23-27min，得到发酵培养基。

所述发酵培养基的组分及占比为：山梨醇400g/L，玉米浆1.3-1.7g/L，碳酸钙0.9-1.1g/L，酵母膏0.9-1.1g/L，消泡剂0.25-0.35g/L；

所述玉米浆和碳酸钙均为标准产品。

所述配制发酵培养基，先加入总量的1/2山梨醇，在发酵步骤中山梨醇锤度降至3时加入总量的1/4山梨醇，待山梨醇锤度再次降至3时再加入总量的1/4山梨醇。

所述发酵，将发酵罐的通气量控制到1.7-1.9L/min，转速控制到440-460rpm，培养温度控制到35-37℃，罐压控制到0.035-0.045MPa培养，持续发酵，每1.9-2.1h取样检测发酵进程，至山梨醇浓度为零，山梨糖含量不再增加时，结束发酵。