[发明专利]一种基于宏基因组测序的游离核酸建库方法在审
| 申请号： | 202210006308.1 | 申请日： | 2022-01-04 |
| 公开（公告）号： | CN114350749A | 公开（公告）日： | 2022-04-15 |
| 发明（设计）人： | 余艳;许寻寻;代冰;唐春燕;葛虎;谭兵健;谢琴 | 申请（专利权）人： | 长沙金域医学检验实验室有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6806 | 分类号： | C12Q1/6806;C12Q1/6869;C40B50/06 |
| 代理公司： | 长沙优企知识产权代理事务所(普通合伙) 43243 | 代理人： | 周栋 |
| 地址： | 410000 湖南省长沙市高新开发区麓天路*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 基于 宏基 组测序 游离 核酸 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种基于宏基因组测序的游离核酸建库方法，其特征在于，所述方法包括样本前处理、样本破壁处理、样本核酸提取和样本核酸文库构建步骤；所述样本为无细胞体液样本；所述样本破壁处理是将样本置于匀浆机中进行3个循环的破壁处理。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述无细胞体液样本为血浆或脑脊液。
3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，样本前处理时，当所述样本为血浆时，在血浆样本中加入全血，且全血与血浆的体积比为1:50至3:50。
4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述全血与血浆的体积比为2:50。
5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，样本核酸提取时，向样本中加入蛋白酶K进行孵育。
6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述蛋白酶K孵育温度为37℃，孵育时间为2h。
7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述样本破壁处理时，将匀浆机的破壁循环参数设置为：6m/sec，60s on，5min off。
8.如权利要求2所述的方法，其特征在于，当样本为血浆时，所述样本文库构建采用酶切法。
9.如权利要求2所述的方法，其特征在于，当样本为脑脊液时，所述样本文库构建采用转座酶法。
10.一种宏基因组测序方法，其特征在于，所述方法是采用权利要求1至9任一项所构建的样本文库进行上机测序。
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