[发明专利]一种马来酸顺反异构酶突变体有效
| 申请号： | 202210006581.4 | 申请日： | 2022-01-05 |
| 公开（公告）号： | CN114317510B | 公开（公告）日： | 2023-07-04 |
| 发明（设计）人： | 周哲敏;刘中美;王畅;王相玉;周丽;崔文璟;郭军玲 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N9/90 | 分类号： | C12N9/90;C12N15/61;C12P13/20;C12N15/70;C12N1/21;C12R1/19 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 仇钰莹 |
| 地址： | 214122 江苏省无锡市滨*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 马来 顺反异构 突变体 | ||
【权利要求书】：
1. 一种马来酸顺反异构酶突变体，其特征在于，以氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示的序列为亲本序列，将第96位的谷氨酰胺取代谷氨酸，将第100的丙氨酸取代为甲硫氨酸。
2.编码权利要求1所述的马来酸顺反异构酶突变体的基因。
3.含有权利要求2所述基因的载体。
4.表达权利要求1所述马来酸顺反异构酶突变体或含有权利要求2所述基因的微生物细胞。
5.根据权利要求4所述的微生物细胞，其特征在于，以大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、毕赤酵母为宿主细胞。
6.一种生产天冬氨酸的方法，其特征在于，利用表达权利要求1所述来酸顺反异构酶突变体以及天冬氨酸酶AspA的微生物细胞转化马来酸生成L-天冬氨酸。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，将所述微生物细胞在培养体系中培养至OD600为0.6~0.8，加入诱导剂诱导14~16h，收集菌体；将菌体添加至以马来酸为底物的反应体系中反应4~12h。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述反应体系中底物浓度为3.0~4.0M，菌株OD600=5±0.5，在pH8±1、37~45℃下反应。
9.权利要求1所述来酸顺反异构酶突变体，或权利要求4或5所述微生物细胞在生产L-天冬氨酸产品中的应用。
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