[发明专利]一种蝴蝶兰的组织培养基及其繁殖方法

说明书

本发明公开了一种蝴蝶兰的组织培养基，所述培养基包括诱导培养基、增殖培养基、壮苗培养基、生根培养基；蝴蝶兰的组织培养繁殖的方法，其方法包括：1)材料消毒，2)外植体接种，3)组培苗的增殖培养，4)壮苗培养，5)生根培养，6)炼苗驯化，7)移栽。具有增殖培养期短，繁殖系数高，移栽成活率可高达99％以上，以上是一种高效、快速提供优质蝴蝶兰种苗的方法。采用本发明的方法，即可大量得到可出瓶种植的种苗是一种不受季节等因素影响，高效、快速提供优质蝴蝶兰种苗的方法，可以加速良种推广速度。

技术领域

本发明涉及植物组织培养技术领域，具体涉及一种蝴蝶兰的组织培养基及其繁殖方法。

背景技术

蝴蝶兰[phalaenopsis]为兰科蝴蝶兰属植物，它是一种热带气生兰，俗称“洋兰”。蝴蝶兰花型似蝴蝶，形态美妙﹑色彩丰富﹑花期长，在热带兰中素有“兰花皇后”之美称。蝴蝶兰种类丰富，分布广，东起菲律宾、新几内亚，南达澳大利亚北部，西苏门答腊，北到我国台湾、云南、四川西部均有原种(野生的蝴蝶兰〉存在，约有50多种，其中我国有7种，全部为附生兰。蝴蝶兰商品化大规模栽培十分成功，是近年来在国际花卉市场上最受欢迎的洋兰。从离体器官诱导产生类原球茎，通过类原球茎的增殖培养，得到大量幼苗，为实现蝴蝶兰工厂化生产奠定了基础。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是：针对已有蝴蝶兰组培技术中存在的不定芽繁殖系数偏低,从而影响增殖效率与种苗质量的缺陷提供一种能快速\高效获得大量优质种苗的蝴蝶兰组织培养基及繁殖方法。

为解决上述技术问题，采用的技术方案为：一种蝴蝶兰的组织培养基，所述培养基包括诱导培养基、增殖培养基、壮苗培养基、生根培养基；

所述的诱导培养基为MS+BA3.5mg/L+NAA0.2mg/L+蛋白陈2g/L+椰汁 100mL/L+白糖20g/L+琼脂5g/L，pH＝5.5-5.6。

所述的增殖培养基为1/2MS+6-BA 3.5mg/L+KT1.0mg/L+NAA0. 4mg/L+蛋白陈2g/L+椰汁100mL/L+白糖20g/L，琼脂5g/L，pH＝5.5-5.6；

所述的壮苗培养基为MS+6-BA2mg/L+蛋白陈2g/L+椰汁100mL/L+糖 30g/L+琼脂5g/L，pH＝5.5～5.6；

所述的生根培养基为1/2MS+BA1.5mg/L+NAA0.2mg/L+白糖25g/L+琼脂 6g/L+80g/L香蕉泥，pH＝5.5-5.6。

所要解决的第二个技术问题是：一种蝴蝶兰的组织培养繁殖的方法，其步骤包括：

1)材料消毒：花梗花朵开放2～3朵时采切花梗作为外植体材料；将花梗剪成一芽一段，用自来水清洗干净，无菌水冲洗干净，将每段花梗芽剥去苞皮，用70Vol.％酒精与0.1Wt.％升汞水溶液形成的混合液浸泡7min灭菌，无菌水冲洗5-6次后，备用；

2)外植体接种：将灭菌后花梗段接种到诱导培养基中，在25～28℃、光强1800Lx、光照11h/d组培条件下培养6-7天，侧芽膨大并向外伸长到1.0-2.0cm 时成外植体无菌苗；

3)组培苗的增殖培养：将诱导的芽切去叶片和基部接种到增殖培养基中，在25～28℃、光强1500～2000Lx，光照12h/d，增殖倍数＞5；

4)壮苗培养：将增殖的芽切分开转接到壮苗培养基中，培养温度23～27℃，光照1500～2000Lx，每天光照10～12h，培养5～10天；

5)生根培养：将经壮苗培养后的蝴蝶兰苗接种到生根培养基中，培养温度23～27℃，光照1500～2000Lx，每天光照12h，培养至少具有2条≥长5cm 的根；

6)炼苗驯化：将定植子瓶苗转至驯化温室驯化炼苗20～25天；