[发明专利]多酚氧化酶及其编码基因和应用有效
| 申请号： | 202210022095.1 | 申请日： | 2022-01-10 |
| 公开（公告）号： | CN114350628B | 公开（公告）日： | 2022-12-09 |
| 发明（设计）人： | 虞沂;曹应龙;刘亚婷 | 申请（专利权）人： | 湖北碳元本草生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/02 | 分类号： | C12N9/02;C12N15/53;C12N15/70;C12N1/21;C12P19/44;C12R1/19 |
| 代理公司： | 武汉蓝宝石专利代理事务所(特殊普通合伙) 42242 | 代理人： | 方菲 |
| 地址： | 430000 湖北省武汉市东湖新技术开发*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 氧化酶 及其 编码 基因 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种多酚氧化酶，其为序列如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列组成的蛋白质。
2.一种权利要求1所述的多酚氧化酶的编码基因，其特征在于，基因为序列如SEQ IDNO.2所示的DNA分子。
3.一种包含权利要求2所述的多酚氧化酶的编码基因的表达盒、重组载体或者重组菌。
4.一种重组大肠杆菌，其特征在于，包含权利要求2所述的多酚氧化酶的编码基因。
5.权利要求1所述的多酚氧化酶在体外催化红景天苷生成羟基红景天苷或者体外催化肉苁蓉新化合物生成毛蕊花苷的工艺中的应用。
6.一种毛蕊花苷或羟基红景天苷的体外合成方法，其特征在于，包括如下步骤：
向缓冲液中分别加入底物和权利要求1所述的多酚氧化酶，所述底物为肉苁蓉新化合物或红景天苷，得混合液；
将所述混合液置于25~35℃下反应，再加入冰甲醇淬灭反应。
7.根据权利要求6所述的体外合成方法，其特征在于，所述缓冲液为pH 7~7.5的Tris-HCl缓冲液。
8.根据权利要求6所述的体外合成方法，其特征在于，所述混合液中还含有抗坏血酸、硫酸铜和/或SDS。
9.根据权利要求6~8任一项所述的体外合成方法，其特征在于，所述混合液中，所述底物和所述多酚氧化酶的浓度比1mM：5μM。
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