[发明专利]OsWRKY53基因在负向调控水稻分蘖形成中的应用

权利要求书

1.OsWRKY53基因在负向调控水稻分蘖数目中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于所述负向调控水稻分蘖数目为敲除OsWRKY53基因后，水稻分蘖数目增多。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于增加水稻分蘖数目的方法包括以下步骤：利用CRISPR/Cas9方法靶向突变水稻OsWRKY53基因，获得敲除突变体oswrky53。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于所述利用CRISPR/Cas9方法靶向突变水稻OsWRKY53基因的具体方法为：

一、根据OsWRKY53基因的CDS序列设计两对靶点引物F1、R1、F2和R2，构建OsWRKY53基因编辑载体

二、将OsWRKY53基因编辑载体转入农杆菌EHA105中，利用农杆菌介导法转化水稻，获得转基因水稻植株；

三、以转基因水稻植株的DNA为模板，用鉴定引物F3和R3进行PCR扩增，筛选出位点编辑纯合的oswrky53突变体。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于步骤一中靶点引物F1的序列为GGCATTCCAGTCGTACCTCTGAGC，引物R1的序列为AAACGCTCAGAGGTACGACTGGAA。

6.根据权利要求4或5所述的应用，其特征在于步骤一中靶点引物F2的序列为GCCGAGCTGGAGGACGGGTACAAC，引物R2的序列为AAACGTTGTACCCGTCCTCCAGCT。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于步骤三中鉴定引物F3的序列为CGGGGTGCCCAAGTTCAAGTC，鉴定引物R3的序列为ATGGAGCAGCCGTTGTAGGTG。