[发明专利]一种放射性同位素碳-14标记瑞德西韦及其制备方法

权利要求书

1.一种放射性同位素碳-14标记瑞德西韦，其特征在于：碳-14标记位点为瑞德西韦分子中吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪标记单元的4-位碳原子，其结构式如下：

星号标示碳-14标记位点。

2.一种如权利要求1所述放射性同位素碳-14标记瑞德西韦的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：

S1，在惰性气体保护和冰-盐浴冷却下，通过吡咯、含碳-14甲酰化试剂(1)和三氯氧磷在无水溶剂中反应制得2-[羰基-¹⁴C]醛基吡咯(2)；

S2，在15～25℃下，中间体2-[羰基-¹⁴C]醛基吡咯(2)与羟胺磺酸在水中反应，然后在-5～0℃于碱性溶液中发生消除反应得2-[氰基-¹⁴C]氰基吡咯，并在-5～0℃下，将中间体2-[氰基-¹⁴C]氰基吡咯在非质子溶剂中与碱和2,4-二硝基苯基羟胺反应，反应混合物经处理和反相制备型HPLC纯化后得1-氨基-2-[氰基-¹⁴C]氰基吡咯(3)；

S3，在惰性气体保护和75～100℃下，中间体1-氨基-2-[氰基-¹⁴C]氰基吡咯(3)与甲脒盐酸盐、无机碱在醇类溶剂中反应，反应混合物经处理和纯化得4-氨基[4-¹⁴C]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(4)；

S4，中间体4-氨基[4-¹⁴C]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(4)与卤代试剂在非质子有机溶剂中反应，反应混合物经处理和纯化获得4-氨基-7-卤[4-¹⁴C]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(5)；

S5，在惰性气体保护和10～25℃下，中间体4-氨基-7-卤[4-¹⁴C]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪(5)与氯硅烷在无水醚类溶剂中反应，以保护氨基；接着在-5～0℃下以格氏试剂脱去氨基保护产物中的卤素发生交换；然后将体系降温至--25～20℃与(3R,4R,5R)-3,4-双(苯氧基)-5-((苯氧基)甲基)二氢呋喃-2(3H)-酮(5a)反应；最后在酸性条件下脱去硅保护基，反应混合物经处理和纯化得(2S,3R,4R,5R)-2-(4-氨基[4-¹⁴C]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3,4-双(苄氧基)-5-[(苄氧基)甲基]四氢呋喃-2-醇(6)；

S6，在惰性气体的保护和-75～-45℃下，中间体(2S,3R,4R,5R)-2-(4-氨基[4-¹⁴C]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3,4-双(苄氧基)-5-[(苄氧基)甲基]四氢呋喃-2-醇(6)溶于干燥的非质子溶剂中，依次与甲磺酸、三氟甲磺酸三甲基硅酯(缩写为TMSOTf)、三甲基氰硅基烷(缩写为TMSCN)反应，反应完毕后用碱液淬灭，反应混合物经处理和制备型HPLC柱纯化得(2R,3R,4R,5R)-2-(4-氨基[4-¹⁴C]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3,4-双(苄氧基)-5-[(苄氧基)甲基]四氢呋喃-2-腈(7)；

S7，在惰性气体的保护和-75～-50℃下，中间体(2R,3R,4R,5R)-2-(4-氨基[4-¹⁴C]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3,4-双(苄氧基)-5-[(苄氧基)甲基]四氢呋喃-2-腈(7)在无水二氯甲烷中与三氯化硼反应；反应结束后，反应混合物经处理得(2R,3R,4S,5R)-2-(4-氨基[4-¹⁴C]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-腈(8)；

S8，在10～30℃下，中间体(2R,3R,4S,5R)-2-(4-氨基[4-¹⁴C]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-腈(8)在酸催化下与2,2-二甲氧基丙烷反应1～2h；反应完毕，反应混合物经处理和纯化得(3aR,4R,6R,6aR)-4-(4-氨基[4-¹⁴C]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-6-(羟甲基)-2,2-二甲基四氢呋喃[3,4-d][1,3]二氧戊环基-4-腈(9)；

S9，在惰性气体的保护和-5～5℃下，中间体(3aR,4R,6R,6aR)-4-(4-氨基[4-¹⁴C]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-6-(羟甲基)-2,2-二甲基四氢呋喃[3,4-d][1,3]二氧戊环基-4-腈(9)与t-BuMgCl在无水非质子溶剂中反应30min～40min；然后加入2-乙基丁基[(全氟苯甲基)(苯氧基)磷酰基]-L-丙氨酸酯(9a)，在15～30℃下搅拌12～16h，反应混合物经处理得2-乙基丁基-N-({[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-氨基[4-¹⁴C]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-6-氰基-2,2-二甲基四氢呋喃[3,4-d][1,3]二氧戊环基-4-基]甲氧基}(苯氧基)磷酰基)-L-丙氨酸酯(10)；

S10，在0～30℃下，将中间体2-乙基丁基-N-({[(3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-氨基[4-¹⁴C]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-6-氰基-2,2-二甲基四氢呋喃[3,4-d][1,3]二氧戊环基-4-基]甲氧基}(苯氧基)磷酰基)-L-丙氨酸酯(10)与酸反应，反应混合物经常规后处理得外消旋体2-乙基丁基-N-{[(2R,3S,4R,5R)-5-(4-氨基[4-¹⁴C]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基]甲氧基}(苯氧基)磷酰基)-L-丙氨酸酯(11)；

S11，外消旋体2-乙基丁基-N-{[(2R,3S,4R,5R)-5-(4-氨基[4-¹⁴C]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基]甲氧基}(苯氧基)磷酰基)-L-丙氨酸酯(11)经手性HPLC柱拆分获得目标物(2-乙基丁基-N-((S)-{[(2R,3S,4R,5R)-5-(4-氨基[4-¹⁴C]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基]甲氧基}(苯氧基)磷酰基)-L-丙氨酸酯；简称为[¹⁴C]-瑞德西韦)(12)。