[发明专利]Tecrl敲除小鼠模型的构建方法及其应用

权利要求书

1.一种Tecrl基因缺陷小鼠模型的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

A、根据基因敲除的靶点，设计针对Tecrl基因的sgRNA，所述sgRNA的序列如SEQ IDNO.1和SEQ ID NO.2所示；

B、将Cas9 mRNA及sgRNA同时注射入体外培养的实验小鼠受精卵中，再将受精卵移植到超排的母鼠内，得到Tecrl基因成功敲除的F0代小鼠。

2.根据权利要求1所述的Tecrl基因缺陷小鼠模型的构建方法，其特征在于，所述方法还包括将Tecrl基因成功敲除的F0代小鼠进行回交得到稳定基因型的F1代小鼠，将F1代小鼠与野生型小鼠杂交得到F2代小鼠，再将F2代小鼠相互交配得到F3代Tecrl敲除小鼠的步骤。

3.根据权利要求1所述的Tecrl基因缺陷小鼠模型的构建方法，其特征在于，步骤B中，所述Cas9 mRNA和sgRNA注射量分别为20ng/μL,5ng/μL。

4.一种Tecrl基因缺陷导致左心功能下降的小鼠模型的构建方法，其特征在于，包括将权利要求2所述的F3代Tecrl敲除小鼠进行正常饲养6-8周后，表现为心脏收缩和舒张功能受损，即构建得到左心功能下降的小鼠模型。

5.一种根据权利要求4所述方法构建的小鼠模型在筛选治疗左心功能下降的药物中的应用。

6.一种Tecrl基因缺陷介导的室性心动过速小鼠模型的构建方法，其特征在于，包括将权利要求2所述的F3代Tecrl敲除小鼠进行正常饲养6-8周后，对F3代Tecrl敲除小鼠使用腹腔注射肾上腺素和咖啡因，得到室性心动过速的小鼠模型。

7.根据权利要求6所述的Tecrl基因缺陷介导的室性心动过速小鼠模型的构建方法，其特征在于，所述肾上腺素和咖啡因的注射剂量分别为1.6-3mg/kg、120mg/kg。

8.根据权利要求6所述的Tecrl基因缺陷介导的室性心动过速小鼠模型的构建方法，其特征在于，所述室性心动过速包括儿茶酚胺敏感性室速。

9.一种根据权利要求6-8任一项所述方法构建的小鼠模型在筛选治疗室性心动过速的药物中的应用。

10.一种用于构建Tecrl基因缺陷小鼠模型的sgRNA，其特征在于，所述sgRNA的序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。