[发明专利]一株抗病促生草莓生物菌及生物有机肥制备方法

说明书

本发明所述的一株抗病促生草莓生物菌保藏编号为CGMCCNo.19859，所述的抗病促生草莓生物菌应用于肥料中。所述的抗病促生草莓生物菌剂的制备方法包括菌株生物菌剂的制备、抗病促生混合菌剂的制备和生物有机肥的制备。

技术领域

本发明涉及农业微生物领域，尤其涉及一株具有养分活化、促生、拮抗功能的微生物菌以及由该微生物菌制取生物有机肥的方法。

背景技术

草莓属蔷薇科草莓属植物，因其色泽艳丽、香甜味美且富含丰富的维生素、胡萝卜素、鞣酸等多种营养物质，具有较高的营养和经济价值，市场需求量较大，是世界范围内广泛种植的经济作物之一。

草莓产业的快速发展，长期大面积连作，造成土壤生态破坏加剧，连作障碍问题日趋严重，病虫害增加，草莓的可持续发展受到制约。尤其是草莓栽培主要采用设施栽培，设施栽培环境下，因缺少雨水淋洗，温湿度高，土壤次生盐碱化、酸化、病原菌积累问题尤其突出，土壤微生物区系劣变，病害高发，据报道连作4年草莓能减产40％以上。目前，大家公认的连作障形成机理主要包括土壤质量退化、病原微生物积累、土壤营养元素失衡、化感作用、土壤微生态失衡等多个方面。而土壤微生态失衡是研究者所公认的连作障碍发生的根本。

现有研究发现，草莓连作3年后的土壤中优势真菌与新茬土壤存在显著差异。新茬土壤中占优势的真菌丰度值大幅下降，而连作土壤中丰度值增高的真菌大多与植物病害发生相关。如连作土壤中占优势的丝核菌、轮枝菌、镰刀菌等在连作后大量增加，这些病原菌能引起多种植物(包括草莓)黑根病、立枯病、叶腐病、茎腐、枯萎病等病害的发生，从而加重连作障碍。

因此，如何通过采用现代生物技术，利用有益微生物，调控种植草莓土壤微生物区系，改善土壤理化性质，抑制病原微生物的生长，从而有效防控土传病害的发生，被认为是解决草莓种植土壤的有效方法。但目前还没有一种效果明显的此类微生物菌及其对应的肥料。

发明内容

本发明目的是提供一株抗病促生草莓生物菌及生物有机肥制备方法。

本发明的目的是解决现有草莓连作土壤存在的连作障碍问题。

本发明通过以下技术方案来实现：

本发明所述的一种抗病促生草莓生物菌为解淀粉孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)，已于2020年5月21日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏编号为CGMCCNo.19859。

所述的一种抗病促生草莓生物菌应用于肥料中，所述的肥料为微生物肥料。

所述的一种抗病促生草莓生物菌的分离筛选方法，所述的分离筛选方法至少包括如下步骤：

根际功能微生物菌株筛选培养基根际功能微生物菌株的筛选采用LB培养基。

(1)土壤样品的采集与根际功能微生物的分离

采集温州苍南县马站镇设施种植大棚发病区块内健壮的植株，轻轻带土拔出植株，带回实验室用于抗病促生菌株的分离筛选，采集时间为2019年。分离筛选时，轻轻抖落植株根系上松散的附着土，将植株自根茎处剪断，称取10g带根际土的植物根系置于盛有灭菌玻璃珠和90mL无菌水的锥形瓶中，28℃、170r·min^-1振荡30min，得到悬浮液，按照梯度浓度稀释，涂布于LB培养基上(选择10^－4、10^－5、10^－6三个梯度进行涂布，每个梯度三次重复)，恒温培养箱中28℃倒置培养18h，挑取生长迅速、不同形态的单菌落于新的平板上，划线纯化3-4次，分别编号，挑取菌落加入体积分数为15％的灭菌甘油于-80℃保藏待用。

(2)拮抗功能微生物的筛选