[发明专利]一种流感病毒检测试剂盒及其应用

说明书

本发明公开了一种组合产品，所述组合产品为两种甲型H1N1病毒HA蛋白的抗体或其抗原结合片段的组合，包含单抗抗体1和单克隆抗体2；所述的单克隆抗体1结合的抗原表位位于优化后的甲型H1N1病毒HA蛋白的aa98～aa164位；所述的单克隆抗体2结合的抗原表位位于优化后的甲型H1N1病毒HA蛋白的aa364～aa409位。本发明还公开了一种用于检测甲型H1N1病毒的试剂盒，所述试剂盒包括有效量的单克隆抗体1和单克隆抗体2以及配套的检测试剂。本发明制备的单克隆抗体具有良好的特异性和敏感性，适用于制备不同的甲型H1N1病毒诊断试剂，如胶体金、ELISA、化学发光等检测试剂盒。

技术领域

本发明属于病毒疫病诊断技术领域，具体涉及一种流感病毒检测试剂盒及其应用。

背景技术

流行性感冒病毒简称流感病毒，主要分为甲(A)、乙(B)、丙(C)三型。流感病毒可引起人、禽、猪、马、蝙蝠等多种动物感染和发病，是人流感、禽流感、猪流感、马流感等人与动物疫病的病原。流感的典型临床症状是急性高热、全身疼痛、显著乏力和呼吸道症状。流感病毒主要通过空气中的飞沫、易感者与感染者之间的接触或与被污染物品的接触而传播。人流感主要是甲型流感病毒和乙型流感病毒引起的。甲型流感病毒经常发生抗原变异，可以进一步分为H1N1、 H3N2、H5N1、H7N9等亚型(其中的H和N分别代表流感病毒两种表面糖蛋白)。

甲型H1N1病毒属于正粘病毒科、甲型流感病毒属，为单股负链RNA病毒，基因组约为13.6kb。典型病毒颗粒呈球状，直径为80nm～120nm，有囊膜。囊膜上有许多放射状排列的突起糖蛋白，分别是血凝素HA、神经氨酸酶NA和M2 蛋白。病毒颗粒内为核衣壳，呈螺旋状对称，直径为10nm。甲型H1N1病毒的 8个基因节段共编码11种蛋白,其中第4节段RNA编码的HA蛋白是病毒表面最主要的糖蛋白，具有较强的免疫原性，可以激发体液免疫和细胞免疫，诱导机体产生针对流感病毒的中和抗体，是决定病毒毒力的主要因素，也是甲型H1N1病毒诊断的主要靶蛋白之一。

发明内容

为了弥补现有技术的不足，本发明的目的之一，提供一种甲型H1N1病毒 HA蛋白的单克隆抗体及其制备方法；本发明的目的之二，提供了一种使用本发明制备的单克隆抗体制备甲型H1N1病毒检测试剂盒。

因此，本发明一方面公开了一种组合产品，所述组合产品为两种甲型H1N1 病毒HA蛋白的抗体或其抗原结合片段的组合，包含单抗抗体1和单克隆抗体2；所述的单克隆抗体1的的重链可变区序列为：

MLYLLFCLVTFPSCVLSQVQLKQSGPGLVQPSQSLSITCTVTEFVSVTSYGVH WIRQLPEKGLEWLGVIWSGGSQDYNAAFDSHTWISKDNSKQEFFFKVNSLKP ADTAIYYCARAGDYNYDGQAYWGQGTLVTVSA；

所述的单克隆抗体1的轻链可变区序列为：

MWNVQIFSASVILSRGQIVDEQSPAIMSASPGKKVTMTCSGQVSVSFMYWYQ QRPGSSPRLLIYDTSNLASGVPVRFSGSGSGTSYSGTIRRMEAEDAASFGCQP WSTYPLTFGAGSKLE LKSE；

所述的单克隆抗体2的的重链可变区序列为：

MERTYQVQLKESGFGLVAPSQKLWVFRCTKSGPSNSRYSVHWVRQPPFKGL EWLGMIWGGSETDWNSALKSRLSFSKDNSHSQVFDFVMGDLQTDDTAMYY CARDGFFFDDYAPDYWGQG TSVTVSSE；

所述的单克隆抗体2的轻链可变区序列为：