[发明专利]一种提高发状念珠藻胞外多糖体外抗氧化活性和生物絮凝性的方法有效
申请号: | 202210045530.2 | 申请日: | 2022-01-15 |
公开(公告)号: | CN114410708B | 公开(公告)日: | 2023-09-29 |
发明(设计)人: | 高翔;袁晓龙;刘畅 | 申请(专利权)人: | 陕西科技大学 |
主分类号: | C12P19/04 | 分类号: | C12P19/04;C12N1/38;C12N1/20;C08B37/00;C12R1/89 |
代理公司: | 西安通大专利代理有限责任公司 61200 | 代理人: | 范巍 |
地址: | 710021*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 提高 念珠 藻胞外 多糖 体外 氧化 活性 生物 絮凝 方法 | ||
1.一种提高发状念珠藻胞外多糖体外抗氧化活性和生物絮凝性的方法,其特征在于,包括如下步骤:
步骤1,将发状念珠藻接种到BG11液体培养基中,加入氧化石墨烯水溶液,使氧化石墨烯的浓度为15mg/L,得到培养体系;
步骤2,将培养体系在日光灯下进行恒温摇床培养,之后将所得培养液中的胞外多糖依次进行提取和纯化,得到发状念珠藻胞外多糖。
2.根据权利要求1所述的一种提高发状念珠藻胞外多糖体外抗氧化活性和生物絮凝性的方法,其特征在于,步骤2所述的培养体系在恒温摇床培养期间,温度为24-26℃,光强为40-45μmolphotons m-2s-1。
3.根据权利要求1所述的一种提高发状念珠藻胞外多糖体外抗氧化活性和生物絮凝性的方法,其特征在于,步骤2所述的培养体系在恒温摇床培养期间,转速为120-140rpm。
4.根据权利要求1所述的一种提高发状念珠藻胞外多糖体外抗氧化活性和生物絮凝性的方法,其特征在于,步骤2所述的培养体系恒温摇床培养10-20天。
5.根据权利要求1所述的一种提高发状念珠藻胞外多糖体外抗氧化活性和生物絮凝性的方法,其特征在于,步骤2按如下过程将所得培养液中的胞外多糖依次进行提取和纯化:
将所述的培养液在80-95℃下加热45-75min,得到混合液A,之后将混合液A离心后收集上清液,在上清液中加入乙醇进行沉降,然后将乙醇去除,剩余溶液冷冻干燥,得到粗胞外多糖,使用Sevage溶液除去粗胞外多糖中的蛋白质,最后将所得的混合物利用层析柱进行纯化。
6.根据权利要求5所述的一种提高发状念珠藻胞外多糖体外抗氧化活性和生物絮凝性的方法,其特征在于,使用所述的Sevage溶液按如下过程除去粗胞外多糖中的蛋白质,得到所述的混合物:
按200mg:4mL:1mL的比例,将粗胞外多糖、去离子水和Sevage溶液振荡后静置,分离得到上清液,之后去除上清液中的Sevage溶液,将剩余溶液冷冻干燥,得到所述的混合物。
7.根据权利要求6所述的一种提高发状念珠藻胞外多糖体外抗氧化活性和生物絮凝性的方法,其特征在于,按如下过程将所得的混合物利用层析柱进行纯化:
将所得的混合物用去离子水配制成溶液,之后倒入层析柱内,依次加入蒸馏水和NaCl溶液进行洗脱,将洗脱液旋蒸浓缩后进行透析和冷冻干燥,完成所得混合物的纯化,得到发状念珠藻胞外多糖。
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