[发明专利]一种提高发状念珠藻胞外多糖体外抗氧化活性和生物絮凝性的方法

说明书

本发明提供一种提高发状念珠藻胞外多糖体外抗氧化活性和生物絮凝性的方法，所述方法包括如下步骤：步骤1，将发状念珠藻接种到含有氧化石墨烯的液体培养基中，得到培养体系；步骤2，将培养体系在日光灯下进行恒温摇床培养，之后将所得培养液中的胞外多糖依次进行提取和纯化，得到发状念珠藻胞外多糖。本发明通过添加外源物质氧化石墨烯的方式提高了胞外多糖体外抗氧化活性和生物絮凝性，操作简单易行、污染较少、成本较低，可应用于工业化生产。

技术领域

本发明涉及蓝藻活性物质技术领域，具体为一种提高发状念珠藻胞外多糖体外抗氧化活性和生物絮凝性的方法。

背景技术

发状念珠藻是一种陆生固氮蓝藻，分布于中国西北或西北部干旱和半干旱的荒漠地带。由于其对特殊环境的适应和进化，形成了耐干旱、耐温差、耐高光、耐碱性和耐紫外辐射等生理特性，其中胞外多糖在保护藻细胞免受极端生境伤害起着重要作用。

胞外多糖是发状念珠藻在细胞表面分泌的一种酸性多糖，主要由葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖、鼠李糖和少量葡萄糖醛酸组成。胞外多糖具有多种生物活性，如体外抗氧化、抑菌、抗肿瘤、抗炎症、抗病毒和免疫调节，可应用食品和医药领域。同时，胞外多糖具有生物絮凝性，可吸附重金属离子，在食品工业和废水处理中具有一定应用价值。

胞外多糖的体外抗氧化活性和生物絮凝性在一定程度上受细胞培养条件的影响，如温度、光照和营养元素，同时也受盐胁迫影响。目前生产得到的发状念珠藻胞外多糖存在体外抗氧化活性和生物絮凝性较低和成本较高的问题。

发明内容

针对现有技术中胞外多糖生物活性低和生产成本高的问题，本发明提供一种提高发状念珠藻胞外多糖体外抗氧化活性和生物絮凝性的方法，通过添加外源物质氧化石墨烯的方式提高了胞外多糖体外抗氧化活性和生物絮凝性，操作简单易行、污染较少、成本较低，可应用于工业化生产。

本发明是通过以下技术方案来实现：

一种提高发状念珠藻胞外多糖体外抗氧化活性和生物絮凝性的方法，包括如下步骤：

步骤1，将发状念珠藻接种到含有氧化石墨烯的液体培养基中，得到培养体系；

步骤2，将培养体系在日光灯下进行恒温摇床培养，之后将所得培养液中的胞外多糖依次进行提取和纯化，得到发状念珠藻胞外多糖。

优选的，步骤1中所述液体培养基中氧化石墨烯的浓度不大于50mg/L。

优选的，步骤2所述的培养体系在恒温摇床培养期间，温度为24-26℃，光强为40-45μmol photons m^-2s^-1。

优选的，步骤2所述的培养体系在恒温摇床培养期间，转速为120-140rpm。

优选的，步骤2所述的培养体系恒温摇床培养10-20天。

优选的，步骤2按如下过程将所得培养液中的胞外多糖依次进行提取和纯化：

将所述的培养液在80-95℃下加热45-75min，得到混合液A，之后将混合液A离心后收集上清液，在上清液中加入乙醇进行沉降，然后将乙醇除去后，剩余溶液冷冻干燥，得到粗胞外多糖，使用Sevage溶液除去粗胞外多糖中的蛋白质，最后将所得的混合物利用层析柱进行纯化。

进一步，使用所述的Sevage溶液按如下过程除去粗胞外多糖中的蛋白质，得到所述的混合物：

按200mg：4mL：1mL的比例，将粗胞外多糖、去离子水和Sevage溶液振荡后静置，分离得到上清液，之后去除上清液中的Sevage溶液，将剩余溶液冷冻干燥，得到所述的混合物。

进一步，按如下过程将所得的混合物利用层析柱进行纯化：