[发明专利]一种单细胞水平检测HLA-I/II类基因表达分型和表达量的试剂盒及使用方法

权利要求书

1.一种单细胞水平检测HLA-I/II类基因表达分型和表达量的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含以下内容：

（a）用于HLA-I/II类基因捕获的HLA Target Mix1；

（b）用于HLA-I/II类基因捕获的HLA Target Mix2；

（c）用于HLA-I/II类基因捕获的PCR试剂；和

（d）用于捕获后DNA文库构建的试剂。

2.根据权利要求1所述的一种单细胞水平检测HLA-I/II类基因表达分型和表达量的试剂盒，其特征在于，所述内容（a）用于HLA-I/II类基因捕获的HLA Target Mix1，适用于携带单细胞信息的cDNA样品，所述单细胞信息为1-50bp的核酸序列，位于cDNA的5’端、中间、或3’端。

3.根据权利要求1所述的一种单细胞水平检测HLA-I/II类基因表达分型和表达量的试剂盒，其特征在于，所述内容（a）用于HLA-I/II类基因捕获的HLA Target Mix1，由包含靶向HLA I和靶向HLA II某一位置区域的多条寡聚核苷酸、共用寡聚核苷酸组合而成。

4.根据权利要求1所述的一种单细胞水平检测HLA-I/II类基因表达分型和表达量的试剂盒，其特征在于，所述内容（b）用于HLA-I/II类基因捕获的HLA Target Mix2，由包含靶向HLA I和靶向HLA II另一位置区域的多条寡聚核苷酸、共用寡聚核苷酸组合而成。

5.根据权利要求3所述的一种单细胞水平检测HLA-I/II类基因表达分型和表达量的试剂盒，其特征在于，所述HLA Target Mix1由共用寡聚核苷酸5’引物、靶向HLA-I的A、B、C基因的7号外显子的引物、HLA-II的DRB1、DRA1、DPA1、DPB1、DQA1、DQB1基因4号外显子的引物组成。

6.根据权利要求4所述的一种单细胞水平检测HLA-I/II类基因表达分型和表达量的试剂盒，其特征在于，所述HLA Target Mix2由共用寡聚核苷酸5’引物、靶向HLA-I的A、B、C基因的6或7号外显子的引物、HLA-II的DRB1、DRA1、DPA1、DPB1、DQA1、DQB1基因4号外显子另一区域的引物组成。

7.根据权利要求3-4所述的一种单细胞水平检测HLA-I/II类基因表达分型和表达量的试剂盒，其特征在于，所述HLA Target Mix2中HLA-I和II的靶向引物结合位点位于HLATarget Mix1中HLA-I和II的靶向引物的内侧。

8.根据权利要求1-7所述的一种单细胞水平检测HLA-I/II类基因表达分型和表达量的试剂盒，其特征在于，所述各引物的使用范围在所给出的目的基因引物结合位点上下200bp的范围内，即HLA-A,B,C和HLA-DPA,DPB,DQA,DQB,DRA,DRB靶向引物结合位点第一个核苷酸和最后一个核苷酸上下游200bp的范围。