[发明专利]马氏珠母贝黏液用于提取外泌体的用途、外泌体及其提取方法和应用在审
申请号: | 202210053356.6 | 申请日: | 2022-01-18 |
公开(公告)号: | CN114480249A | 公开(公告)日: | 2022-05-13 |
发明(设计)人: | 李承勇;洪鹏志;周春霞;千忠吉;任磊;梁燕秋;孙省利 | 申请(专利权)人: | 广东海洋大学;广东海洋大学深圳研究院 |
主分类号: | C12N5/07 | 分类号: | C12N5/07;A61K35/618;A61P17/00;A61P29/00 |
代理公司: | 北京隆源天恒知识产权代理有限公司 11473 | 代理人: | 丁晴晴 |
地址: | 524088 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 珠母 黏液 用于 提取 外泌体 用途 及其 方法 应用 | ||
1.马氏珠母贝黏液用于提取外泌体的用途。
2.一种外泌体的提取方法,其特征在于,采用超速离心法和过滤方法从马氏珠母贝黏液中提取外泌体。
3.根据权利要求2所述的外泌体的提取方法,其特征在于,所述采用超速离心法和过滤方法从马氏珠母贝黏液中提取外泌体包括:
对所述马氏珠母贝黏液进行过滤及初步离心处理,得到待提取液;
对所述待提取液进行超速离心处理,得到第二底部沉淀;
用缓冲液重新悬浮所述第二底部沉淀,所得重悬液即为所述外泌体。
4.根据权利要求3所述的外泌体的提取方法,其特征在于,对所述待提取液进行两次所述超速离心处理得到所述第二底部沉淀,两次所述超速离心处理的离心力均为100000g。
5.根据权利要求4所述的外泌体的提取方法,其特征在于,所述对所述待提取液进行两次所述超速离心处理包括:
将所述待提取液置于水平转子中,进行第一次超速离心处理70min,弃去上清液,得到第一底部沉淀;
对所述第一底部沉淀进行洗涤后,进行第二次超速离心处理90min,弃去上清液,得到所述第二底部沉淀。
6.根据权利要求5所述的外泌体的提取方法,其特征在于,所述对所述第一底部沉淀进行洗涤包括:采用PBS溶液对所述第一底部沉淀进行洗涤。
7.根据权利要求3所述的外泌体的提取方法,其特征在于,所述对所述马氏珠母贝黏液进行过滤及初步离心处理包括:
对所述马氏珠母贝黏液进行过滤后,得到滤液;
对所述滤液进行第一次离心处理和第二次离心处理,得到第一上清液,其中,所述第一次离心处理的离心力为500g,离心时间为10min,所述第二次离心处理的离心力为2000g,离心时间为10min;
对所述第一上清液进行第三次离心处理,得到的第二上清液即为所述待提取液,其中,所述第三次离心处理的离心力为10000g,离心时间为30min。
8.根据权利要求3所述的外泌体的提取方法,其特征在于,所述缓冲液包括PBS溶液。
9.一种外泌体,其特征在于,采用如权利要求2-8任一项所述的外泌体的提取方法提取得到。
10.一种外泌体在用于治疗皮肤炎症方面的应用,其特征在于,所述外泌体为权利要求9所述的外泌体。
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